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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產地:進口、國產
    • 貨號:BK-P64484
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發布日期: 2020-10-29
    • 更新日期: 2025-11-12
    產品詳請
    產地 進口、國產
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64484
    用途 公司產品僅用于科研
    包裝規格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

    產品名稱

    規格

    貨號

    山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

    50

    BK-P64484

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標記 6 個離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    魚卵黃高0蛋白   ELISA.   96T/48T              α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名:α-硫辛酸  分子式:C8H14O2S2 

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    魚類狀腺原酸(T3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  α-D-Glucose  中文名:α-D-葡萄糖  分子式:C6H12O6 

    魚類主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Zolmitriptan  139264-17-8  中文名:佐米曲普坦  分子式:C16H21N3O2
    APP Others Human  APP / Protease nexin-II 細胞裂解液 (陽性對照) 噻托溴銨Tiotropium bromide anhydrous 質量規格:>97%,BR,無水物

    肺微內皮細胞裂解物HPMECL氨基阿苯達唑砜Aminoalbendazole Sulfone質量規格:美國進口

    XPNPEP2 Others Human  XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 細胞裂解液 (陽性對照) 西立伐他汀內酯Cerivastatin Lactone質量規格:美國進口

    BRL 大鼠肝細胞去甲基西立伐他汀鈉鹽Desmethyl Cerivastatin,  Salt質量規格:美國進口

    CL-0126JAR(胎盤細胞)5×106cells/瓶×2羥基西立伐他汀鈉鹽Hydroxy Cerivastatin  Salt質量規格:美國進口
    細胞;HOS 大鼠成纖維細胞完全培養基 100mL鹽酸拉貝洛爾(標準品)Labetalol 質量規格:含量測定

    原代骨骼肌細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml水楊酰胺(標準品)Salicylamide質量規格:HPLC法含量測定

    EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 細胞裂解液 (陽性對照) 非普拉宗(標準品)Feprazone質量規格:UV法溶出度檢查

    敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21茴三硫;膽維他Anethole trithione質量規格:>99%,BR

    倉鼠卵巢細胞;Lec1 高轉移細胞,HO-8910PM細胞 SCF細胞,白鰱尾鰭細胞茴三硫(標準品)Anethole trithione質量規格:含量測定
    Cefotaxime   中文名:頭孢噻肟鈉  分子式:C16H17N5NaO7S2    豬圓環病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Cefixime  中文名:頭孢克肟  分子式:C16H15N5O7S2    豬病毒抗體IgGELISA試劑盒   48T/96T   試劑盒   組裝/原裝

    Cefcapene pivoxil   中文名:鹽酸頭孢卡品酯  分子式:C23H32ClN5O9S2    豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Caudatin  中文名:告達庭  分子式:C28H42O7    豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

    Catalponol methylthiomethyl ether  中文名:  分子式:C17H22O2S    豬圓環病毒Ⅱ型(PCV-)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

    山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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