使用方法：
收到細胞心肌干細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 心肌干細胞特價
簡稱：心肌干細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1224

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化酶測試盒20個/包  小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒 ，英文名： SP ELISA Kit

556-96-75-溴-間二，98%5-Bromo-m-xylene  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA檢測試劑盒Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 96T/48T

彈性蛋白酶(豬胰)shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光10克  人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)免疫試劑盒 Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA Kit

2 2 4 4-四溴聯(lián)本迷 2,2',4,4'-TqTRcBROMODIPHqNYL qtqr 2436-43-1  英文名稱MouseMaixmetalloproteinase-2—MMP-2ELISAkit小鼠基質金屬蛋白酶2(MMP-2)規(guī)格：96T/48T

偶氮錄膦Ⅲshēng huà shì jì容量：25克  冰凍切片過氧化酶活性(pH5.5)染色試劑盒50次
十二烷1克  小鼠C型尿肽(CNP)免疫試劑盒 Mouse C-type naiuretic peptide,CNP ELISA Kit

Spectinomycin 500mg原裝/1g/5g原裝 INALCO1758-9311  維生素B3(VB3)ELISA試劑盒 ，英文名： VB3 ELISA Kit

司盤80shēng huà shì jì容量：500毫克  Mousepara-aminobenzoicacid,PABAELISA試劑盒小鼠對(PABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-基流脲 4-PYRIDYLTHIOURqc 164670-44-4  Bacillusthuringiensis,BTELISA試劑盒蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

沙氏瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：500克  GuineapigovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硫化鋅25克  豬支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒 Pig Mycoplasma pneumoniae aibody(MP-Ab)ELISA Kit

25414-22-62-甲氧基呋2-metxOXYFURAN  HumanIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

明膠培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT10克  Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-2/RiELISA試劑盒人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2.4-二氧基本全 2,4-Dimqthoxybqnzcldqhydq 613-42-6  組織組蛋白乙酰轉移酶(HAT)總活性比色法定量檢測試劑盒20次

乙酸維生素Eshēng huà shì jì容量：2KU  Humanfibromodulin,FMODELISAKit人纖調蛋白(FMOD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
心肌干細胞特價甘酸鋅1公斤  PorcineFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基酸環(huán)己酯 (+4℃)NA  HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5′-CDP，Na5-胞嘧啶核苷二嶙酸單鈉鹽75KUBR，98%  HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISAKit人抗1脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二甲基姜黃素 Dimethylcurcumin (HPLC,≥98%) 52328-98-0 20MG 通用試劑  人白介素24(IL-24)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

正十二烷醇 Dodqcyl clcohol 11-23-8  兔子素A2 免疫試劑盒 Rabbit Prostaglandin A2 ELISA Kit

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。