基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 精原細胞直銷
簡稱：精原細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1277

使用方法：
收到細胞精原細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

亞硝基-R-鹽，英文名或英文縮寫：nitnoso R salt，級別：BS，規(guī)格：25克  人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

青鮮素鉀鹽，英文名或英文縮寫：Maleic hydrazide potewwium salt，級別：BR，98%，規(guī)格：25毫克  四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit

抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑  Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

固暗藍R鹽;堅牢深藍R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳酸過氧化物酶shēng huà shì jì容量：1克*5  兔轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Polypeptone 250g/1kg 國產(chǎn)  Rat platelet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD6 a GP- II 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6

磺胺100克  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit 人肺表面活性物質相關蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

6-羌基多巴安輕溴醋鹽 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0  HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISA試劑盒人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 測序緩沖液 (1X 帶顏色)測序級1LRT  組織β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒20次
亮酸基肽酶1克2～8℃，避光  異質核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 ，英文名： SYNCRIP/HPQ/NSAP1 ELISA Kit

Piperacillin 1g原裝 INALCO1758-9170  Mousealkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒小鼠堿性酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁基羥基，英文名或英文縮寫：BHA，級別：CP，99%，規(guī)格：1克  ELISAKiesistin小鼠抵抗素規(guī)格：48T/96T

芴同 9-Fluorqnonq 486-2-9  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

電解，英文名或英文縮寫：Lead，級別：AR，99%，規(guī)格：25克  人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
精原細胞直銷放現(xiàn)菌肉湯培養(yǎng)基支RT  犬轉移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit

(魚精DNA)  英文名稱MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1規(guī)格：96T/48T

低熔點瓊脂糖shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  冰凍切片組織細胞色素C氧化酶表達免疫熒光檢測試劑盒10/20次

軟骨速酶 (-20℃) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9  ratEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-蘋果酸 DL-Malic acid (≥98%) 6915-15-7 25G 通用試劑  小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 ，英文名： CD5L ELISA Kit