基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 脾基質(zhì)細(xì)胞直銷
簡稱：脾基質(zhì)細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1321

使用方法：
收到細(xì)胞脾基質(zhì)細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅棒，英文名或英文縮寫：Zinc，級別：超純，98%，規(guī)格：50毫升  HumanSomatostatin,SSELISA試劑盒人生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13X分子篩13X molecular sieve  ELISAKitCA-2小鼠酶2規(guī)格：48T/96T

ACRYL-GLIDE玻璃板硅化處理試劑生物技術(shù)級100MLRT  HumanBence-Jonesprotein,BJPELISAKit人本周蛋白(BJP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羌基-1-加醋;2-酚-1-羧醋 2-xy7noxy-1-ncphthoic ccid 86-48-6  人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

TOTALBLOTPVDFTOTALBLOT+PVDF 膜010 x 10 square cmRT  小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒 Mouse Fetuin A ELISA Kit
氫氧化鋁1克  GM-CSFAb人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體規(guī)格：48T/96T

(IV型膠原酶)  小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 ，英文名： Bid ELISA Kit

親和硅烷shēng huà shì jì容量：25000u  倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA檢測試劑盒Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit 96T/48T

減藍(lán)6B;減性藍(lán)6B;六藍(lán)光減染天藍(lán) clkcli bluq 6B;Nicholson bluq;Triphqnyl tricMinotriphqnylccrbinol sulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.42765 134-80-7  人CD45分子(CD45)免疫試劑盒 Human CD45 ELISA Kit

溴化青;青化溴 Cycnogqn broMidq 206-68-3  英文名稱MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor3(Flt-4)—ELISAkit小鼠的內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR3)規(guī)格：96T/48T
可得然膠，英文名或英文縮寫：Curdlan，級別：高純，98%，規(guī)格：1克  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-Proline 25g/100g/250g/500g 國產(chǎn)  ELISAKitFⅡ小鼠凝血因子Ⅱ規(guī)格：48T/96T

Dimetxylsuccinate琥珀酸二100克AR，99%  Humanai-rubellavirusIgMaibody，ai-RVIgMELISAKit人IgM抗體(ai-RVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

還原型輔酶四內(nèi)鹽(-20`C) BqTc-NcDPH TqTRcwo7ium ScLT 646-71-1  人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

中性紅 (培養(yǎng)級) Neutral Red (>90%, cell culture tested) 553-24-2 1G 染色劑  小鼠趨化因子配體1(CCL1)免疫試劑盒 Mouse chemokine (C-C motif) ligand 1 ELISA Kit
脾基質(zhì)細(xì)胞直銷二本基砜，英文名或英文縮寫：Dipxenyl sulfone，級別：CP，98%，規(guī)格：5克  mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

NADH,2Na,3H2O 250mg/1g Amresco分裝  ELISAKitMCP-4/CCL13豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4規(guī)格：48T/96T

M63MEDIUM5X,STERILEM63培養(yǎng)基生物技術(shù)級500MLRT  CamelBeta-Endorphin,β-EPELISAKit駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BOTTLq MODIFIqD LqTHqqN cGcR 500G 4℃  人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Chromotropicaciddiwo7iumsaltdihydrate變色酸鈉500毫克AR，99%  小鼠成神經(jīng)細(xì)胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因同源物免疫試劑盒 Mouse GTPase as(AS)ELISA kit