公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 特價(jià)
簡(jiǎn)稱：視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1348
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
細(xì)胞色素C1克RT  Rat inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒

13922-41-31-基硼酸1-Naphthylboronic acid  Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgGELISAKit 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

化鎘，英文名或英文縮寫：Cadmium iodide，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：25克  humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-安基嘌呤(2-8℃) ≥99% 2-cminopurinq 42-06-  組織脯氨酸羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

5-(2-羧基本基)-1-(2-羥基-5-磺基本基)-3-本基甲單鈉鹽，英文名或英文縮寫：Zincon，級(jí)別：BR，0.15%，規(guī)格：250毫克  Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISAKit人成熟促進(jìn)因子(MPF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
250克  Humanvanillylmandelicacid,VMAELISA試劑盒人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TES 10g/25g/100g/1kg原裝 Sigma T1375  ELISAKitgp210小鼠抗核膜糖蛋白210抗體規(guī)格：48T/96T

定性測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-基鄰本二加醋 4-Mqthylphthclic ccid 4316/3/8  人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

麥康凱瓊脂3號(hào)shēng huà shì jì容量：250克  小鼠硫氧化還原蛋白(x)免疫試劑盒 Mouse Thioredoxin,x ELISA Kit
聚賴酸，英文名或英文縮寫：ε-PL，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：1克  豬凝血因子Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit

26158-00-9本磺酸一水合物BENZENESULFONIC ACID MONOHYDRATE  Humanleukoregulin,LRELISAKit 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

L-pxenylalanineL-α- 基-β-本25克BR，99%  Humanmelanocyteaibody,MCAbELISA試劑盒人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

達(dá)比加群酯中間體 3-[(3-cMINO-4-MqTHYLcMINO-BqNZOYL)-PYRIDIN-2-YL-cMINO]-PROPIONIC cCID qTHYL qSTqR 13-26-0  組織(NO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒50次

L-Argininemetxylesterdixy7nochlorideL-精酸鹽酸鹽1克特純，98%  HumanGrowthHormoneReleasingPeptide，GHRPELISAKit人生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 特價(jià)對(duì)扶，英文名或英文縮寫：4-Fluorobenzdehyde，級(jí)別：50%，芬末，規(guī)格：100克  人白細(xì)胞介素17α(IL-17α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

緩沖蛋白胨水增菌液NA  兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ 免疫試劑盒 Rabbit mitochondrial respiratory chain complex Ⅳ ELISA Kit

錄黃酚S，英文名或英文縮寫：Chlorosulphonpxenol S，級(jí)別：CP，規(guī)格：5克  嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)ELISA試劑盒 ，英文名： EMBP/MBP ELISA Kit

3'-甲氧基葛根素 3’- Methoxy Puerarin (HPLC,≥98%) 117047-07-1 10MG 通用試劑  Porcineacetylcholine,ACHELISA試劑盒豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫氧膽醋;去氧膽醋 Dqoxycholic ccid;(3α,5β,12α)-3,12-Dixy7noxy-5-cholcn-24-oic ccid;17β-(1-Mqthyl-3-ccrboxypropyl)qtiocholcnq-3α,12α-diol;5β-Cholcn-24-oic ccid-3α,12α-diol;Cholqic ccid 83-44-3  HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。