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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    HCT15/Fu價格
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:科研
    • 貨號:CE031
    • 價格: ¥1200/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-10-30
    • 更新日期: 2025-11-11
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 科研
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 CE031
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    組織來源
    細胞形態(tài) 懸浮
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質(zhì)期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態(tài) 詳見說明書
    物種來源 Human
    包裝規(guī)格
    純度 %
    是否進口

    基本特性:
    1 )組織來源于正常人肺組織。
    2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
    3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
    4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml
    5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
    6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
    公司產(chǎn)品僅用于科研
    中文名稱: HCT15/Fu價格
    簡稱:人結(jié)氟尿嘧啶耐藥株

    種屬:Human

    來源:

    培養(yǎng)基:1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU

    狀態(tài):

    產(chǎn)品規(guī)格:

    單位:

    貨號:CE031

    使用方法:
    收到細胞HCT15/Fu價格后,請按照以下方法進行操作。
    1.
    取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
    2.
    待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
    3.
    細胞傳代
    1)
    吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
    2)
    添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
    3)
    用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    4)
    待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


    實驗操作:
    1
    、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
    2
    、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
    3
    、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
    4
    、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
    5
    、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
    6
    、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
    7
    、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
    8
    、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
    9
    、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
    10
    、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

    操作規(guī)程:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
    1
    )準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
    2
    )培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
    3
    )凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1
    )復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
    2
    )細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

    無水氧化鋇,英文名或英文縮寫:Barium oxide,級別:CP99%,規(guī)格:25  HumanCalretinin,CRELISA試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    Paclobutrazol 10g/250g 國產(chǎn)  重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒50

    GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級5X75MLCOLD  Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    紫外光吸收劑UV-360 Bisoctrizolq 103297-42-1  小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    Alloxanmonohydrate阿脲一水合物25CP  Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒
    葡糖酸內(nèi)酯shēng huà shì jì容量:100  人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    CollagenaseV 100mg Sigma分裝  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit

    5-胞苷二嶙酸單鈉鹽100  乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒 ,英文名: ACC ELISA Kit

    cLLTqC-1000  MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    松胞速B(-20) CYTOCHcLcSIN B 14930-96-  ELISAKitCETP小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格:48T/96T
    結(jié)合珠蛋白,英文名或英文縮寫:Haptoglobin from pooled human plasma,級別:高純,50u/mg,規(guī)格:100  人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒 Human TGF β2 ELISA Kit

    肉湯瓊脂培養(yǎng)基Broth Agar Medium  硫嘌呤S-甲基轉(zhuǎn)換酶(TPMT)ELISA試劑盒 ,英文名: TPMT ELISA Kit

    COLOREDLAEMMLISTACKINGGELSOLUTION濃縮膠溶液(帶顏色)蛋白組學級透明洋紅色液體RTsigma  Ratbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA試劑盒大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    5--2- 5-Bromo-2-fluoro,97% 93777-26-5 5G 通用試劑  HumanCollageype,ColELISA試劑盒人Ⅰ型膠原(Col)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    阿米卡星/丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3--3-脫氧-alpha-D-葡糖基-(16)-O-(6--6-脫氧-alpha-D-葡糖基-(14)-N-(4--2-羥基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺鹽/Amikacin sulfate salt BR674-786ug/mg 250/1000毫克 國產(chǎn)/進口  HumanErythropoietinEPOELISAKit人紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    HCT15/Fu價格靛藍胭脂紅shēng huà shì jì容量:5  ELISAKitP-PKC人化蛋白激酶C規(guī)格:48T/96T

    D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原裝 Fluka 48280  小鼠CD34分子(CD34)ELISA試劑盒 ,英文名: CD34 ELISA Kit

    酚酞二嶙酸四鈉鹽1克保存:-20  大鼠凝血因子Ⅲ(F)ELISA檢測試劑盒Ratcoagulationfactor,FELISAKit 96T/48T

    姆沙伯 G NAW ChroMosorb G NcW;  c-fos 免疫試劑盒 Human c-fos ELISA Kit

    聚乙二醇 600 Poly(ethylene glycol) 600 (PEG 600) 25322-68-3 250G 通用試劑  英文名稱MouseDPP4ELISAKit小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)規(guī)格:96T/48T


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