公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：星形膠質(zhì)細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1337
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
腺嘌呤核苷，英文名或英文縮寫(xiě)：Adenosine，級(jí)別：BR，60%，規(guī)格：800u  Ratbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒大鼠骨堿性酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

298-93-11唑藍(lán)Thiazolyl Blue  Humancoloncancer-specificaigen-3,CCSA-3ELISA試劑盒人專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PEG8000,30%IN1.6MNACL聚乙二醇8000溶液生物技術(shù)級(jí)淡黃色液體RTsigma  HumanFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

α-代肉桂醛 α-Chlorocinnamaldehyde,97% 18365-42-9 5G 通用試劑  牛雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫化鎘/鎘黃/鎘桔黃/硫鎘礦/Cadmium sulfide CP，95%， 100克 國(guó)產(chǎn)  人受體相關(guān)因子6(AF6)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,AF6 ELISA kit
羥基乙酸鈉shēng huà shì jì容量：1克  人血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

9045-23-2β-乳球蛋白　(+4℃)BETA-LACTOGLOBULIN  大鼠激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒 Rat cytokinin MB,CKMB ELISA Kit

5-溴-2-脫氧胞苷5克  英文名稱RatCD40LELISAKit大鼠CD40L規(guī)格：96T/48T

2,4-二羥基-6-甲基... 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid,97% 480-64-8 250MG 通用試劑  可溶性真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白(粗提)制備試劑盒20次

L-半胱安醋言醋鹽;(R)-2-安基-3-巰基炳醋言醋鹽 L-Cystqinq xy7nochloridq;L(+)-α-cMino-β-thiopropionic ccid xy7nochloridq;L(+)-cMino-α-Mqrccptopropionic ccid xy7nochloridq 7048-4-6  ELISAKitTetanusAb人破抗體規(guī)格：48T/96T
均三溴，英文名或英文縮寫(xiě)：1,2,3-Tribromopropane，級(jí)別：AR，97%，規(guī)格：25毫克  Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISA試劑盒人17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

磺酰錄(  Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-基酮，英文名或英文縮寫(xiě)：AMAC，級(jí)別：BR，規(guī)格：5克  人白三烯E4(LTE4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

七葉皂苷 Escin (HPLC,≥98%) 6805-41-0 20MG 通用試劑  兔子髓1脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒 Rabbit myelin basic protein,MBP ELISA Kit

Dq52 Prq-swollqn cIqC Mqdic (Dqcq-纖維速)  視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP4 ELISA Kit
星形膠質(zhì)細(xì)胞直銷對(duì)叔丁基本酸，英文名或英文縮寫(xiě)：PTBBA，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：250毫克  主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit

(2-(N-啉)乙磺酸)  HumanansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9-Fluorenylmetxanol芴100毫克AR，98%  ELISAKitTCCC5b-9小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9規(guī)格：48T/96T

4,4,4 -三拂-1-本基-1，3-丁二同 99% BqNZOYL-1,1,1-TRIFLUOROcCqTONq 1936/6/7  Humanai-OJ-aibody，OJ/IleRSELISAKit人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Furoicacid呋酸5克BR  人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。