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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    賈第蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):BK-P63502
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-11-05
    • 更新日期: 2025-11-12
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號(hào) BK-P63502
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50T
    純度 %
    CAS編號(hào)
    是否進(jìn)口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    規(guī)格

    貨號(hào)

    賈第蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

    50T

    BK-P63502

    實(shí)驗(yàn)方法步驟:

    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer
    5 μl     dNTP mix
    2mM
    4 μl
    引物110pM
    2 μl
    引物210pM
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl
    1 μl
    ddH2O 50 μl

    PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2
    、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
    2.
    標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

    微量樣品DNA提取試劑盒 50T  Androst-2-en-17-one 中文名:5α-雄甾-2--17- 分子式:C19H28O 度:98.0%

    微量二(MDA)測(cè)定試劑盒(TBA法) Polyhydroxybutyrate  26744-04-7 中文名:聚羥基丁酸酯 分子式:C12H20O7 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

    微量二(MDA)測(cè)定試劑盒(TBA法) Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  2099-26-5 中文名:雄甾-5--3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

    微量DNA凝膠回收試劑盒 50T  Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  1449-61-2 中文名:7-酮基去氫表雄酮醋酸酯 分子式:C21H28O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

    微晶纖維素 50g  Androst-2-en-17-one  963-75-7 中文名:5α-雄甾-2--17- 分子式:C19H28O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
    Hs68(男性正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 變異鏈球菌碳酸鍶(>98%,BC)Strontium carbonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

    平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)硫酸鍶(>98%,BC)Strontium sulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

    TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2'-甲氧基胞苷2-OMe Cytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4N2-異丁酰基鳥(niǎo)苷一水合物ibu-rG質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    FO細(xì)胞,*瘤細(xì)胞 胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞 CL-0208SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N4-苯甲酰胞苷Bz-rC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
    F11 Others Human  F11 / FXI 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羥基1灰石Hydroxyapatite質(zhì)量規(guī)格:>99%,粒徑20nm

    上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-2EpiCGS-2羥丙基甲基纖維素(粘度11250-21000mPas)Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas

    CTNNB1 Others Human  beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羥丙基甲基纖維素Hydroxypropylmethylcellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s

    細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]羥丙基甲基纖維素(30000 mpa.s)HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR

    S-180細(xì)胞,腹水瘤細(xì)胞 細(xì)胞,CRL-2780細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO羥丙基甲基纖維素(4000mpasHPMC, hydroxypropyl methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格:粘度K4m4000 mpa.s
    5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 度:98.0% 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    Acyclovir  中文名:阿昔洛韋 分子式:5O3 度:99.0% 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    4-Aminobenzophenone  中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0% 小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    N-Acetylcaprolactam  中文名:N-乙酰己內(nèi)酰胺 分子式:C8H13NO2 度:98.0% 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    4-Aminoantipyrine  中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0% 小鼠緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
    1
    RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
    2
    )客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
    3
    )客戶(hù)盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    聯(lián)系方式
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