PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：海藻百伯史坦菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

蛋白質(zhì)羰基含量測(cè)定試劑盒（測(cè)血清、組織）（紫外比色法）  Avanafil  330784-47-9  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3 

蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/24樣              Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（總蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)  Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/mlBSA)   1ml  3-Amino-2-naphthoic acid  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%

膽堿酯酶（CHE）測(cè)定試劑盒（比色法）                    Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4
Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S    人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   人脂蛋白脂酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂蛋白脂酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  41263-74-5  中文名：  分子式：C8H8N2O4    人脂蛋脂酶A2elisa試劑盒   人脂蛋脂酶A2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂蛋脂酶A2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Tiagabine hydrochloride  145821-59-6  中文名：鹽酸噻加賓  分子式：C20H26ClNO2S2    人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit  

Felodipine  72509-76-3  中文名：非洛地平  分子式：C18H19Cl2NO4    中文名稱   方法   規(guī)格

Ranolazine dihydrochloride  95635-56-6  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4    人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit
海藻百伯史坦菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書脫水長春堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Anhydrovinblastine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineIerleukin1α,IL-1αELISA試劑盒豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

長春新堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Vincristine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨成型蛋白2(BMP2)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP2 ELISA Kit

硫酸金雀花堿；硫酸司巴丁（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sparteine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T

高烏甲素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Lappaconitine  質(zhì)量規(guī)格：滴定法≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠水閘蛋白1(Cldn1)試劑盒 Rat Claudin-1,Cldn1 ELISA kit

番茄紅素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Lycopene  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,標(biāo)準(zhǔn)品,充氮?dú)獗Ｗo(hù) 英文名稱RatCA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物(CA153)規(guī)格：96T/48T

苔黑酚葡萄糖苷；地衣二醇葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Orcinol glucosid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品 活化蛋白C(APC)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

短葶山麥冬皂苷C（標(biāo)準(zhǔn)品）  Liriope muscari baily saponins C  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitSmad7人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7規(guī)格：48T/96T

百兩金素A（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ardisiacrispin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： BMP-2 ELISA Kit

柳穿魚黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pectolinarigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T

瓜子金皂苷己（標(biāo)準(zhǔn)品）  Polygalasaponin F  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人病毒抗體(IgM)試劑盒 Human bordetella peussis aibody IgM ELISA kit
阿立哌唑  Aripiprazole  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 冰凍切片組織蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒-LEPTIN10/20

阿立哌唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Aripiprazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20

子囊霉素  Ascomycin,FK520  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 冰凍切片組織蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20

子囊霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ascomycin,FK520  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20

阿扎那韋  Atazanavir  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0% 冰凍切片組織鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

阿扎那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）  Atazanavir  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

鹽酸托莫西汀  Atomoxetine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 冰凍切片組織線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

鹽酸托莫西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Atomoxetine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒50

阿托伐醌,阿托喹酮  Atovaquone  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 冰凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

阿托伐醌,阿托喹酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Atovaquone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 冰凍切片組織組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。