PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：1牛腺病毒通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

金黃地鼠可溶性間黏附分子1   英文名稱：   Golden hamster soluble Vascular Cellular Adhesion Molecule 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   sVCAM-1  Alogliptin benzoate  中文名：阿格列汀苯甲酸鹽  分子式：C25H27N5O4  度：98.0%

金黃地鼠壞死因子α   英文名稱：   Golden hamster Tumor Necrosis Factor α   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TNFα  Alogliptin benzoate  中文名：阿格列汀苯甲酸鹽  分子式：C25H27N5O4 

結核分枝桿菌抗體   英文名稱：   Mycobacterium Tuberculosis Aibody   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TB  p-Nitrohydrocinnamic acid  16642-79-8  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  關鍵詞： 

結締組織生長因子 (CTGF)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Araliadiol  1354638-93-9  中文名：  分子式：C15H20O2 

結蛋白 (Desmin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Nicorandil  65141-46-0  中文名：尼可地爾  分子式：C8H9N3O4  度：98.0%  關鍵詞：
2-Acetonaphthone  1993/8/3  中文名：2'-萘乙酮  分子式：C12H10O    人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯吸附測定試劑盒   Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit              

1'-Acetonaphthone  941-98-0  中文名：1'-萘乙酮  分子式：C12H10O    人總鐵結合力（TIBC）ELISA試劑盒  

Exemestane  107868-30-4  中文名：依西美坦  分子式：C20H24O2    人總特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒  

Hemapolin  4267-80-5  中文名：甲基環硫雄醇中間體 E  分子式：C20H32OS    人總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒  

Formestane  566-48-3  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3    人總蛋白（TP）ELISA試劑盒
1牛腺病毒通用PCR檢測試劑盒直銷檸檬苦素，黃柏內酯(橙皮提取)   Limonin  質量規格：HPLC≥98%,橙皮提取 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒Rat15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit 96T/48T

硬脂酸(50%)  Stearic acid  質量規格：含量50%，藥用級 人表皮生長因子受體(EGFR)試劑盒 Human EGFR ELISA Kit

硬脂酸(98%)  Stearic acid  質量規格：含量98%,藥用級 RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

牛蒡苷元(標準品)  Arctigenin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 NFKAPPABP65蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25

牛蒡子苷（標準品）  Arctiin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

日當藥黃素(標準品)  Swertiajaponin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠果糖胺(FRA)ELISA試劑盒 ，英文名： FRA ELISA Kit

牛磺膽酸鈉(標準品)  Taurocholic acid  Salt  質量規格：TLC≥97%，標準品 大鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測試劑盒RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

牛磺膽酸鈉  Taurocholic acid  Salt  質量規格：>97%,BR 人表皮生長因子(EGF)試劑盒 Human Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit

諾米林（標準品）  Nomilin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒規格：96T/48T

歐當歸內酯A（標準品）  Levistilide A  質量規格：HPLC≥98%，標準品 NFKAPPABP65蛋白共沉淀分析試劑盒5
巴氯芬(標準品)  Baclofen  質量規格：HPLC>98%,標準品 Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規格：96T/48T

巴洛沙星(標準品)  Balofloxacin Dihydrate  質量規格：> 98%,水合物標準品 Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規格：96T/48T

巴洛沙星  Balofloxacin Dihydrate  質量規格：度> 98.5%,BR,二水合物 Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鹽酸苯達莫司汀  Bendamustine HCl  質量規格：度> 98% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA試劑盒規格：96T/48T

鹽酸苯達莫司汀（標準品）  Bendamustine HCl  質量規格：HPLC>98%,標準品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISA試劑盒大鼠Smad1ELISA試劑盒規格：96T/48T

倍他米松  Betamethasone  質量規格：>98%  RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA試劑盒規格：96T/48T

倍他米松（標準品）  Betamethasone  質量規格：HPLC>98% ,標準品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISA試劑盒大鼠Smad7ELISA試劑盒規格：96T/48T

比阿培南  Biapenem  質量規格：度>97% RatMotilin,MTLELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

比阿培南（標準品）  Biapenem  質量規格：HPLC>98%,標準品 RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

膽紅素(標準品)  Bilibubin  質量規格：UV≥98%，標準品 RatMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone,MIS/AMHELISAKit大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒規格：96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。