技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：達(dá)氏疏螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
雞球蛋白A(IgA)ELISAKit                 Tinidazole  19387-91-8  中文名：替硝唑  分子式：C8H13N3O4S 

雞極elisa試劑盒   雞極試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   雞極試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞極試劑盒、雞極elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Tazobactam acid  89786-04-9  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

雞白介素4elisa試劑盒   雞白介素4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   雞白介素4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞白介素4試劑盒、雞白介素4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  2-Aminoisonicotinic acid  中文名：2-氨基異煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit     Tinidazole  中文名：替硝唑  分子式：C8H13N3O4S 

雞5核苷酸酶elisa試劑盒   雞5核苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   雞5核苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞5核苷酸酶試劑盒、雞5核苷酸酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Tazobactam acid  89786-04-9  中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S
Mesterolone  1424-00-6  中文名：甲氫睪酮  分子式：C20H32O2    人轉(zhuǎn)移因子(TF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

Testosterone undecanoate  5949-44-0  中文名：十一酸睪酮  分子式：C30H48O3    人轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit               

4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名：4-氯去氫甲基睪酮  分子式：C20H27ClO2    人轉(zhuǎn)鐵蛋白（F）ELISA試劑盒  

Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O    人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒  

Mefenamic acid  61-68-7  中文名：甲滅酸  分子式：C15H15NO2    人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒
達(dá)氏疏螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ginsenoside Rh3  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitASD人雄烯二同規(guī)格：48T/96T

人參皂苷Ro（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ginsenoside Ro  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 ，英文名： Casp-3 ELISA Kit

肉豆蔻木脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Myrislignan  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T

肉桂醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Cinnamyl alcohol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人臂板蛋白4C(Sema 4C)試劑盒 Human Sema 4C ELISA Kit

肉桂醛(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cinnamaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：GC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  trans-Cinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Nitsch基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

瑞香素/祖師麻甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Daphnetin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒豬球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三氯蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sucralose  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒

三七皂甙R1（標(biāo)準(zhǔn)品）  Notoginsenoside R1  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Rat immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒

三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trifolirhizin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
氨甲酰甲膽堿；氯貝膽堿  Carbamyl-β-methylcholine chloride   質(zhì)量規(guī)格：>99%,美國(guó)進(jìn)口 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 ，英文名： APC ELISA Kit

茄尼醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Solanesol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseActivinAELISAKit 96T/48T

大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 ，英文名： Activin-A ELISA Kit

秦皮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fraxin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 ，英文名： ACV-A ELISA Kit

秦皮甲素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Esculin  質(zhì)量規(guī)格：≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒 ，英文名： ACV-B ELISA Kit

秦皮甲素  Esculin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR 小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒 ，英文名： ROS ELISA Kit

秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fraxetin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒 ，英文名： GHRL ELISA Kit

秦皮乙素（標(biāo)準(zhǔn)品）  6,7-Dihydroxycoumarin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠饑餓素(GHRL)ELISA試劑盒 ，英文名： GHRL ELISA Kit

秦皮乙素；6,7-二羥基香豆素；七葉亭  6,7-Dihydroxycoumarin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98% 小鼠肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)ELISA試劑盒 ，英文名： ARPC4 ELISA Kit

茄尼醇  Solanesol  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： cTnⅠ ELISA Kit