PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：同牛病毒3型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

緊張素Ⅱ一型受體抗原   英文名稱：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   規格：   48T/96T   英文縮寫：   AT1R  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  16691-43-3  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S 

緊張素Ⅱ   英文名稱：   Angiotensin Ⅱ   英文縮寫：   ANGⅡ   規格：   48T/96T  Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16 

緊張素Ⅰ   英文名稱：   AngiotensinⅠ   英文縮寫：   ANGⅠ   規格：   48T/96T  Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%  關鍵詞：  抗增殖; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

緊張素Ⅰ   英文名稱：   AngiotensinⅠ   規格：   48T/96T   英文縮寫：   ANGⅠ  3-Amino-4-methylbenzamide  中文名：3-氨基-4-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O 

緊張素2受體1型   英文名稱：   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   AG2  Ondansetron hydrochloride  99614-01-4  中文名：鹽酸昂丹司瓊  分子式：C18H20ClN3O  度：98.0%  關鍵詞：
5α-Androstanedione  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2    錳過氧化物酶（MnP）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2    雙縮脲法蛋白含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4    雙縮脲法蛋白含量測試盒   可見分光光度法   100管/96樣           

5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?；?/span>-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7    胰島素樣生長因子結合蛋白5   英文名稱：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   規格：   48T/96T   英文縮寫：   IGFBP5

5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羥甲基糠醛  分子式：C6H6O3    胰島素   英文名稱：   Human Insulin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   INS
同牛病毒3型牛巨細胞病毒PCR檢測試劑盒供應甲基七葉亭 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板反應蛋白(THBS1)ELISA試劑盒 ，英文名： THBS1 ELISA Kit

,二羥基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA檢測試劑盒rabbitsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit 96T/48T

,二羥基(三氟甲基)香豆素 HPLC≥98% 20mg 犬白介素11(IL-11)試劑盒 Canine Ierleukin 11,IL-11 ELISA kit

,二羥基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 英文名稱Humandihy-drotestosteroneElisakit人雙氫睪同(DHT)規格：96T/48T

甲基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pCMV5-AM)感受態菌DH-5α1毫升

,二羥基苯基香豆素 HPLC≥98% 20mg Ratlowdensitylipoprotein,LDLELISA試劑盒大鼠(LDL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

苯基瑞香素甲基醚 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板/內皮細胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)ELISA試劑盒 ，英文名： PECAM-1/CD31 ELISA Kit

羥基基香豆素;黃檀素 HPLC≥98% 20mg 牛金屬硫蛋白(MT)ELISA檢測試劑盒BovineMetallothionein,MTELISAKit 96T/48T

,二羥基甲基香豆素 HPLC≥98% 20mg 人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)試劑盒 Human ADAMTS4 ELISA kit

石當歸素 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseIL-1βELISAKit小鼠白介素1β(IL-1β)規格：96T/48T
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香荊芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蘭素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

香葉木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。