技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：山羊病毒1型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISAKit     2-Methylanthraquinone  84-54-8  中文名：2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒     2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one  5751-20-2  中文名：  分子式：C5H6N2OS 

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類elisa試劑盒   人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒、人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Methyl-4-nitrobenzoic acid  1975-51-5  中文名：  分子式：C8H7NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒     2-Methylanthraquinone  中文名：2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O2  度：98.0%

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類elisa試劑盒   人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒、人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Methyl-4-nitrobenzoic acid  1975-51-5  中文名：  分子式：C8H7NO4
1-Naphthol  90-15-3  中文名：  分子式：C10H8O    Tween80   250ml

3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol  116539-55-0  中文名：  分子式：C8H13NOS    傘形   10g

tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-2-carboxylate  114772-40-6  中文名：  分子式：C18H19BrO2    Umbelliferone   25g              

N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine  154212-61-0  中文名：  分子式：C14H23N3O3S    土壤中性0酸酶(S-NP)測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  209414-27-7  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO    土壤堿性0酸酶（S-AKP/ALP）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣
山羊病毒1型PCR檢測試劑盒直銷醋酸磺胺米隆  Mafenide Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISA試劑盒人抗細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硼替佐米中間體I  Bortezomib intermediates I  質(zhì)量規(guī)格：>97% 植物/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

保特佐米蒎烷二醇酯  BortezoMib Pinanediol Ester  質(zhì)量規(guī)格：>97% HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISAKit人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲磺司特  Suplatast tosilate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌紅蛋白(MYO)ELISA試劑盒 ，英文名： MYO ELISA Kit

烯丙基-α-D-吡喃半乳糖苷  Allyl α-D-galactopyranoside  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 人緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA檢測試劑盒HumanAngiotensinaseELISAKit 96T/48T

苯并三氮唑鈉鹽（BTA-S）  BTA-S  質(zhì)量規(guī)格：≥40%澄清淡黃色液體 大鼠硒蛋白P(SEPP1)試劑盒 Rat selenoprotein P, plasma, 1 (SEPP1)ELISA kit

普羅布考  Probucol  質(zhì)量規(guī)格：>99% 英文名稱RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

普羅布考（標(biāo)準(zhǔn)品）  Probucol  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 海洋動物種系COI-5基因擴增分析試劑盒20

Ipatasertib(GDC0068)  GDC-0068;RG7440  質(zhì)量規(guī)格：>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑 ELISAKitFbg人血纖蛋白原規(guī)格：48T/96T

L-天冬氨酸鎂  L-Aspartic acid Mg salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌酐(Cr)ELISA試劑盒 ，英文名： Cr ELISA Kit
刺桐酚素 HPLC≥98% 5mg PCR產(chǎn)物末端平滑處理試劑盒20

刺桐特靈堿 HPLC≥98% 5mg PCR級無離子水500毫升

刺五加甙 C HPLC≥98% 5mg PCR探針TAG聚合酶標(biāo)記試劑盒10

粗毛甘草素 A HPLC≥98% 5mg PDGF-A(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

粗毛淫羊藿苷 HPLC≥98% 5mg PDGF-A蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

醋酸獨活屬醇 HPLC≥98% 5mg PDGF-A蛋白共沉淀分析試劑盒5

達(dá)瑪二烯醇乙酸酯 HPLC≥98% 5mg PDGF-B(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

達(dá)瑪烯二醇II HPLC≥98% 5mg PDGF-B蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

大豆腦苷 I HPLC≥98% 5mg PDGF-B蛋白共沉淀分析試劑盒5

大豆腦苷 II HPLC≥98% 5mg PDGFsR-α人血血小板衍生生長因子可溶性受體α規(guī)格：48T/96T