技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit     Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4 

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4
Escitalopram oxalate  219861-08-2  中文名：草酸西酞普蘭  分子式：C22H23FN2O5    兔6素F1aelisa試劑盒   兔6素F1a試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔6素F1a試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔6素F1a試劑盒、兔6素F1a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4    兔白介素-6(rabbit IL-6)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Ilaprazole  172152-36-2  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S    兔白介素-8(rabbit IL-8)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Ivermectin B1a  71827-03-7  中文名：依維菌素  分子式：C48H74O14    兔白介素-10(rabbit IL-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Neutral berberine sulfate  316-41-6  中文名：硫酸黃連素  分子式：C20H20NO8S    兔白介素-12(rabbit IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝
唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)A66,p110α抑制劑  A66  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitPGF人血小板生長因子規(guī)格：48T/96T

SC-514;IKK-2抑制劑  SC514  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 ，英文名： CK ELISA Kit

γ-環(huán)糊精   γ-Cyclodextrin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 96T/48T

甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精  Me-β-CD  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)試劑盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit

埃博霉素B；帕土匹龍  Epothilone B(EPO906, Patupilone)   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatThyroglobulin,TGELISAKit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BMS-345541  BMS345541  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR L-谷氨酰-α-萘酰胺(L-Glamyl-α-naphthylamide)1克

IKK-16,選擇性IKK抑制劑  IKK16  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

曲格列汀琥珀酸鹽   Trelagliptin succinate；SYR-472  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌生成抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 ，英文名： MSTN ELISA Kit

2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇  2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol   質(zhì)量規(guī)格：美國進口原裝 大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA檢測試劑盒RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 96T/48T

2'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷  2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine    質(zhì)量規(guī)格：美國進口原裝,97% 人補體因子I(CFI)試劑盒 Human CFI ELISA Kit
醋酸卡貝縮宮素,卡比托辛  Carbetocin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠抑制因子受體(LIFR)ELISA檢測試劑盒Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 96T/48T

(±)-柚皮素(標準品)  Naringenin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>90%,標準品 小鼠抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 ，英文名： LIFR ELISA Kit

二乙酰鳥嘌呤  N(2),9-Diacetylguanine  質(zhì)量規(guī)格：>95% 小鼠百白破抗體(DPT)ELISA試劑盒 ，英文名： DPT ELISA Kit

山姜素(標準品)  Alpinetin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 ，英文名： Cys-C ELISA Kit

埃博霉素A  Epothilone A  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑3(CST3)ELISA試劑盒 ，英文名： CST3 ELISA Kit

莫能菌素鈉  Monensin  salt  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR 小鼠半胱酸豐富生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)ELISA試劑盒 ，英文名： CYR61 ELISA Kit

莫能菌素鈉(標準品)  Monensin  salt  質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標準品 小鼠半胱酸天冬酸蛋白酶(caspase-3)ELISA試劑盒 ，英文名： caspase-3 ELISA Kit

馬尿酸  Hippuric acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑盒 ，英文名： GAL1 ELISA Kit

扁蓄苷(標準品)  Avicularin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠半乳凝素12(GAL12)ELISA試劑盒 ，英文名： GAL12 ELISA Kit

匹莫苯丹  Pimobendan  質(zhì)量規(guī)格：>98% 小鼠半乳凝素2(GAL2)ELISA試劑盒 ，英文名： GAL2 ELISA Kit