PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：空腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

人乙脫氫酶elisa試劑盒   人乙脫氫酶試劑盒   規格型號：96T/48T   人乙脫氫酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  154057-56-4  中文名：  分子式：C19H15BrFN 

人原(PI)ELISAKit     Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S  度：98.0%    

人受體β(ISR-β)ELISAKit                 Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S 

人氧化抗體(OLAb)ELISAKit                 Timosaponin AIII  41059-79-4  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13 

人血小板生成素(TPO)酶聯吸附測定試劑盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  15873-25-3  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3
N4-Benzoylcytosine  26661-13-2  中文名：N4-苯甲酰基胞嘧啶  分子式：C11H9N3O2    DPD臭氧測定試劑盒   DPD ozone reage kit

Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  3669-41-8  中文名：2,4-二羥基苯基芐酮  分子式：C14H12O3    臭氧快速試劑盒   Ozone rapid reage kit

5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  13574-13-5  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6    DPD余測定試劑盒   DPD residual  test kit              

N6-Benzyladenine  1214-39-7  中文名：N6-芐基腺嘌呤  分子式：C12H11N5    水樣中離子（Hg2+）濃度測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

Benzidamine hydrochloride  132-69-4  中文名：鹽酸芐達明  分子式：C19H24ClN3O    水樣中六價鉻離子（Cr6+）濃度測試盒   可見分光光度法   50管/48樣
空腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒直銷尿苷-5'-二葡萄糖鈉鹽(UDPG)  Uridine-5-diphosphoglucose di salt   質量規格：>98%,Sigma Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

5-鳥苷一二鈉鹽(GMP)  GMP  質量規格：>98%,BR 小鼠壞死因子樣細胞凋亡弱誘導因子(TWEAK)ELISA試劑盒 ，英文名： TWEAK ELISA Kit

腺苷-5單(進口原裝)   AMP   質量規格：>99,ALFA原裝 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒MouseFollistatin,FSELISAKit 96T/48T

腺苷-5單(AMP)   Adenosine-5-monophosphoric acid   質量規格：>98,BR 人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒 Human ai-Sa-aibody ELISA Kit

5'-尿嘧啶   5-Bromouracil   質量規格：>98%,BR Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規格：96T/48T

尿嘧啶   Uracil   質量規格：>99%,可用于細胞培養 載玻片細胞NFKAPPABP65蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

胞嘧啶   Cytosine   質量規格：>99%,BR MacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISA試劑盒羅氏沼蝦諾達病毒(MrNV)ELISA試劑盒規格：96T/48T

胞嘧啶(標準品)  Cytosine   質量規格：HPLC>98%,標準品 小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 ，英文名： AIL-R4 ELISA Kit

硫酸腺嘌呤   Adenine sulfate   質量規格：>99%,BR,可用于細胞培養 小鼠補體片斷3a(C3a)ELISA檢測試劑盒MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T

硫酸腺嘌呤(標準品)  Adenine sulfate   質量規格：HPLC>98%,標準品 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒 Human ai-Mi2-aibody ELISA Kit
草酰乙酸  Oxaloacetic acid  質量規格：>97%,BR 蛋白雜交封閉溶液100毫升

硫酸鋅七水(AR)  Zinc sulfate, heptahydrate  質量規格：>99.5%,AR 蛋白雜交封閉溶液100毫升

鉀鈉四水  Potassium  tatrate, tetrahydrate  質量規格：>98%,BR 蛋白雜交封閉溶液100毫升

縮二脲  Biuret  質量規格：>98%,BR 蛋白巰基化(S-thiolation)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20

硫酸鎂無水(分子生物學級)  Magnesium sulfate anhydrous  質量規格：>99%,分子生物學級 蛋白巰基化(S-thiolation)同位素法分析試劑盒20

石英砂  Quartz sand  質量規格：BR 蛋白體復合物制備試劑盒20

3-氨基-1,2,4-三唑  3-AT  質量規格：>96%,分子生物學級 蛋白硝基化染色測定試劑盒10

鈉十二水   phosphate, tribasic, dodecahydrate  質量規格：>98%,AR 蛋白樣品沉淀法去內試劑盒20

無水氫二鈉(分子生物學級)   phosphate, dibasic, anhydrous  質量規格：>99%,分子生物學級 蛋白樣品沉淀法去內試劑盒20

菲啰嗪,菲洛嗪  Ferrozine  質量規格：>97%,BR 蛋白樣品多粘菌素層析法去內試劑盒20
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。