技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   人脂蛋白脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋白脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit  2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒              2-Benzylsuccinic acid  中文名：  分子式：C11H12O4 

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit     2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%   

人脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit  2-Aminothiazol-4-acetic acid  29676-71-9  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S
Amitriptyline hydrochloride  549-18-8  中文名：鹽酸阿米替林  分子式：C20H24ClN    0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PSMAD2/3 Ab

2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S    0酸化核因子κB   英文名稱：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   pNFκB

8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S    羧酸酯酶（CarE）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

2-Amino-5-nitrobenzophenone  1775-95-7  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣
熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒價格3,5-二-L-酪氨酸  3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA檢測試劑盒Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit 96T/48T

氟氯西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Flucloxacillin   質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠胃動素(MTL)試劑盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit

巴利森苷A；派立辛  Parishin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCyclinD2ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D2(CyclinD2)規(guī)格：96T/48T

山楂酸,馬斯里酸  Maslinic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA分析試劑盒48/96

2-并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-T  2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% ELISAKitTM人調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格：48T/96T

毛萼乙素  Eriocalyxin B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠緩激肽(BK)ELISA試劑盒 ，英文名： BK ELISA Kit

知母皂苷元  Sarsasapogenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測試劑盒Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 96T/48T

4'-去甲鬼臼  4'-Demethylpodophyllotoxin  質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測定 大鼠維生素K1(VK1)試劑盒 Rat Vitamin K1,VK1 ELISA Kit

杠柳毒苷  Periplocin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatCyclinD1ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D1(CyclinD1)規(guī)格：96T/48T

1,2-二亞油酰甘油  1,2-Dilinoleoylglycerol   質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口原裝 核酸氧化8-氧鳥苷(8-oxo-G)ELISA分析試劑盒48/96
潮霉素B(羅氏原裝)  Hygromycin B  質(zhì)量規(guī)格：羅氏原裝,濃度50mg/ml 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit

芹菜苷; 芹黃苷  Apiin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T

柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷  Chrysoeriol 7-O-glucoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Kaempferol-3-O-rutinoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血清(NO)ELISA檢測試劑盒Ratniicoxide,NOELISAKit 96T/48T

泮托拉唑鈉一水物  Pantoprazole   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒RatSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T

泮托拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品）  Pantoprazole   質(zhì)量規(guī)格：含量測定，一水物 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

鹽酸法舒地爾  Fasudil hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit

鹽酸法舒地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Fasudil hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit

草質(zhì)素苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Rhodionin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測試劑盒Rat50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T

紅景天素；草質(zhì)素甙；  Rhodiosin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥88%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T