技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：衣原體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
乳酸脫氫酶（LDH）測試盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit  3-Acetylcoumarin  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%

乳酸（LD）測試盒（測血清、組織等）   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4 

乳酸（LD）測試盒（測全血）   Lactic acid (LD) test case (whole blood)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

乳酸（LD）（血清、組織）檢測   Lactic acid (LD) (whole blood) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

乳酸（LD）（全血）檢測   Lactate dehydrogenase (LDH) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名：3-乙酰基香豆素  分子式：C11H8O3
Fosaprepitant dimeglumine  265121-04-8  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P    兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   兔骨保護(hù)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔骨保護(hù)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨保護(hù)素試劑盒、兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S    兔鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔鉤端螺旋體IgG試劑盒、兔鉤端螺旋體IgG elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  921769-65-5  中文名：卡培他濱  分子式：C16H20FN3O7    兔分泌型球蛋白Aelisa試劑盒   兔分泌型球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔分泌型球蛋白A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔分泌型球蛋白A試劑盒、兔分泌型球蛋白A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Irbesartan  138402-11-6  中文名：厄貝沙坦  分子式：C25H28N6O    兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒  

Isoniazid  54-85-3  中文名：異  分子式：C6H7N3O    兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒
衣原體PCR檢測試劑盒直銷鹽酸魯拉西酮  Lurasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ELISAKitPro-ANP人前心肽規(guī)格：48T/96T

鹽酸魯拉西酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lurasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基端前腦素(-ProBNP)ELISA試劑盒 ，英文名： -ProBNP ELISA Kit

櫻黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Prunetin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人胰多肽(PP)ELISA檢測試劑盒HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit 96T/48T

香橙素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Aromadendrin(Dihydrokaempferol)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠膠原C末端肽(CTX)試劑盒 Rat C-telopeptide of collagen,CTX ELISA Kit

3',4',7-三羥基黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  3',4',7-Trihydroxyflavone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱Ratlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKIT大鼠LFA-3(CD58)規(guī)格：96T/48T

地克珠利  Diclazuril  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 抗淬滅劑Ⅰ(活體染色持久發(fā)光)5/20毫升

美他環(huán)素,甲烯土霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Metacycline HCl;Methacycline HCl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitPro-ANP人前心肽規(guī)格：48T/96T

美他環(huán)素,甲烯土霉素鹽酸鹽  Metacycline HCl;Methacycline HCl  質(zhì)量規(guī)格：potency>877U per mg 小鼠肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒 ，英文名： FBN1 ELISA Kit

己二酸二  Adipic dihydrazide  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人β-促脂素(β-LPH)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 96T/48T

alpha-亞麻酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Linolenic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%(GC),分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠細(xì)胞色素P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)試劑盒 Rat cytochrome P450, family 7,subfamily A,polypeptide 1,CYP7A1 ELISA kit
達(dá)托霉素  Daptomycin  質(zhì)量規(guī)格：≥930μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatOncostatin-M,OSMELISA試劑盒大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

達(dá)托霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Daptomycin  質(zhì)量規(guī)格：效價測定 Ratoponi,Tn-TELISAKit大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸柔紅霉素  Daunorubicin HCl  質(zhì)量規(guī)格：度大于97%含量84.0-102%,USP30 RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸柔紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Daunorubicin HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸柔紅霉素(進(jìn)口)  Daunorubicin HCl  質(zhì)量規(guī)格：USP,進(jìn)分sigmaD8809  RatOrexinAELISA試劑盒大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷  Decitabine  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Decitabine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷  5-Aza-2′-deoxycytidine  質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號A3656  RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

醋酸德舍瑞林  Deslorelin Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氨加壓素;去氨壓素  Desmopressin Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,醋酸鹽形式 Ratosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T