PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：卡氏枝孢霉PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子 (AGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxiracetam  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3 

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子   英文名稱：   Angiopoietin Growth Factors   英文縮寫：   AGF   規(guī)格：   48T/96T  Oxymetholone  434-07-1  中文名：康復(fù)龍  分子式：C21H32O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子   英文名稱：   Angiopoietin Growth Factors   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AGF  Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

生成素-2   英文名稱：   Angiopoietin-2   英文縮寫：   ANG2   規(guī)格：   48T/96T  Oxymetholone  中文名：康復(fù)龍  分子式：C21H32O3 

生成素-2   英文名稱：   Angiopoietin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANG2  Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8
7-Benzyloxyindole  中文名：7-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO    大鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   Cyclic guanosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP

7-Amino-4-methylcoumarin  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2    乙酰膽堿酯酶（T－CHE）檢測(cè)   Acetylcholine ansferase (ChAT) detection

7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S    乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）檢測(cè)   Detection of the ache of the choline

7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4    丁酰膽堿酯酶檢測(cè)   Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection

7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C12H13NO3    葡萄糖-6-0酸脫氫酶（G－6－PD）檢測(cè)   BN N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detection
卡氏枝孢霉PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格L鼠李糖 HPLC≥98% 100mg 小鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ，英文名： PECAM1 ELISA Kit

L絲氨酸 HPLC≥98% 200mg 牛白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T

L蘇氨酸 HPLC≥98% 200mg 人ADP-核糖基化因子4(ARF4)試劑盒 Human ARF4 ELISA kit

L天冬氨酸 HPLC≥99% 200mg 英文名稱MouseIL-1sRⅠELISAkit小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L天冬酰胺 HPLC≥98% 200mg 冰凍切片組織BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

L纈氨酸 HPLC≥98% 200mg RatClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L異亮氨酸 HPLC≥98% 200mg 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit

L組氨酸 HPLC≥98% 200mg 小鼠抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 96T/48T

L組氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 Human TIMP-1 ELISA Kit

Milataxel HPLC≥98% 20mg Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit大鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硝酸奧昔康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Oxiconazole Nitrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒 ，英文名： SS ELISA Kit

普瑞巴林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pregabalin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠生長(zhǎng)因子(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousegrowthhormone,GHELISAKIT 96T/48T

(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質(zhì)）（標(biāo)準(zhǔn)品）  [(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseRetinol-bindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T

山梨醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  D-Sorbitol  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP ELISA Kit

乙二醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ethylene Glycol  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T

降二氫辣椒堿  Nordihydrocapsaicin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP-4 ELISA Kit

4-甲氨基安替比林（標(biāo)準(zhǔn)品）  4-(Methylamino)-antipyrine  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA檢測(cè)試劑盒MousecyclophilinA,CyPAELISAKit 96T/48T

硫酸肼（標(biāo)準(zhǔn)品）  Hydrazine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：供TLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒 ，英文名： CyPA ELISA Kit

硫酸肼（標(biāo)準(zhǔn)品）  Hydrazine sulfate  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit

環(huán)扁桃酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Cyclandelate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。