技術(shù)服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：肉毒梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
雙氫睪(DHT)ELISAKit                 tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-2-carboxylate  114772-40-6  中文名：  分子式：C18H19BrO2 

雙花扁豆凝集素elisa試劑盒   雙花扁豆凝集素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   雙花扁豆凝集素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：雙花扁豆凝集素試劑盒、雙花扁豆凝集素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  443882-99-3  中文名：  分子式：C13H9ClFNO3 

雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試劑盒     4-Aminohippuric acid  中文名：4-氨基馬尿酸  分子式：C9H10N2O3  度：98.0%

樹突狀細胞相關(guān)C型凝集素-1   英文名稱：   Human Dendritic cell Associated C type Lectin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Dectin 1  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  145163-97-9  中文名：  分子式：C29H48O2  度：%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

桿菌(YP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名：  分子式：C28H46O2  度：%  關(guān)鍵詞：  麥角甾烷; 高等真菌; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Glycodeoxycholic acid  中文名：甘氨脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5  度：98.0%  兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit  

 cholate  中文名：膽酸鈉  分子式：C24H39NaO5  度：98.5%  兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit  

Chenodeoxycholic acid  中文名：鵝去氧膽酸  分子式：C24H40O4  度：99.0%  兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit              

Dioscin  中文名：薯蕷皂苷  分子式：C45H72O16  度：98.5%  兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒  

Pseudoprotodioscin  中文名：偽原薯蕷皂苷  分子式：C51H82O21  度：98.0%  兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒
肉毒梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒供應松柏醇  Coniferyl alcohol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma223735 RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit大鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙酰輔酶A鈉鹽  Acetyl coenzyme A  salt    質(zhì)量規(guī)格：≥93%,美國進口 Karnovsky固著液50毫升

肌苷酸二鈉  Di 5'-Inosinate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR PlaVitaminA,VAELISA試劑盒植物維生素A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)索奈德  Ciclesonide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP9 ELISA Kit

環(huán)索奈德(標準品)  Ciclesonide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品 人前列環(huán)素(PGI)ELISA檢測試劑盒Humanprostacycline,PGIELISAKit 96T/48T

酪氨酰氨  L-Tyrosine amide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma進分 大鼠纖維蛋白原α鏈(Fga)試劑盒 Rat fibrinogen alpha chain,Fga ELISA kit

皂素；茶皂素  saponin  質(zhì)量規(guī)格：BR,皂素>80% 英文名稱RatAngiopoietin-2ELISAKit大鼠生成素-2(ANG-2)規(guī)格：96T/48T

炔諾酮(標準品)  Norethindrone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,標準品 果菜谷氨酸比色法定量檢測試劑盒20

炔諾酮  Norethindrone  質(zhì)量規(guī)格：>97% ELISAKitCPAF人衣原體蛋白酶樣活性因子規(guī)格：48T/96T

可的松(標準品)  Cortisone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標準品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit
蛋白酶K(進分)  Proteinase K  質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝 人促素受體(GsaR)試劑盒 Human GsaR ELISA Kit

蛋白酶K(Sigma)  Proteinase K  質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝 人促?；鞍?/span>(ASP)試劑盒 Human acylation stimulating protein,ASP ELISA Kit

胰凝乳蛋白酶抑制劑  Chymostatin  質(zhì)量規(guī)格：進分 人激素釋放激素(GH)試劑盒 human gonadoopin-releasing hormone,GH ELISA Kit

亮抑蛋白酶肽(進口)  Leupeptin   質(zhì)量規(guī)格：≥95%,進口半硫酸鹽 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 Human secretin receptor,SR ELISA Kit

胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑  Pepstatin A microbial  質(zhì)量規(guī)格：≥90%,進分 人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒 Human Secretin ELISA Kit

巖藻糖；L-巖藻糖  L-(-)-Fucose   質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA檢測試劑盒Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 96T/48T

果膠酶  Pectinase  質(zhì)量規(guī)格：3萬U/g 人催產(chǎn)素(OT)試劑盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit

β-淀粉酶(70萬u/ml液體)  beta-Amylase  質(zhì)量規(guī)格：BR,70萬u/ml液體 人催產(chǎn)素受體(OX)試劑盒 Human OX ELISA Kit

β-淀粉酶(酶活5萬粉末)  beta-Amylase  質(zhì)量規(guī)格：BR,酶活5萬,粉末 人催乳素(PRL)試劑盒 Human Prolactin/Leoopic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit

DNA酶,脫氧核糖核酸酶Ⅰ  Deoxyribonuclease  質(zhì)量規(guī)格：≥2000KU/mg protein,(牛胰) 人催乳素釋放激素(PRH)試劑盒 Human PRH ELISA Kit