PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：溶血梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

酸性成纖維生長因子   英文名稱：   acid fibroblast growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   a-FGF  4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  90-93-7  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O  度：98.0%   

酸性0酸酶（ACP）檢測   Prostate acid  enzyme (PACP) detection  Polypodine B  18069-14-2  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  昆蟲蛻皮激素活性; 歐亞水龍骨; 蛻化類固醇; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）  Repaglinide ethyl ester  中文名：  分子式：C29H40N2O4 

酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）  Repaglinide  中文名：瑞格列奈  分子式：Repaglinide 

素   英文名稱：   Human Renin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RN  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  2397-00-4  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
Makisterone A 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C31H50O7  度：%  兔素(Renin)ELISA試劑盒  

Glaucogenin C mono-D-thevetoside  中文名：  分子式：C28H40O9  度：98.0%  兔神經(jīng)生長因子（NGF）ELISA試劑盒  

17α-Estradiol  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2  度：99.0%  兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒  

Stauntosaponin A  中文名：  分子式：C28H38O7  度：97.0%  兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒           

Ergosta-7,22-dien-3-one  中文名：麥角甾-7,22-二烯-3-酮  分子式：C28H44O  度：95.0%  兔素(Renin)ELISAKit
溶血梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒價格乳清酸  Orotic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),BR 大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T

氟尼酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Niflumic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)試劑盒 Human FGF6 ELISA kit

木聚糖  XYLAN  質(zhì)量規(guī)格：>95%,來源于玉米芯,溶于水 RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿特拉津,莠去津  Atrazine  質(zhì)量規(guī)格：>97% ISCOVE’SMDM培養(yǎng)基1/10升(片劑)

丁苯羥酸  Bufexamac  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR PlaGibberellicAcid,GAELISA試劑盒植物赤霉素(GA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-甘油酸激酶  3-Phosphoglyceric Phosphokinase  質(zhì)量規(guī)格：1000u/mg,Sigma分裝 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA試劑盒 ，英文名： SDF-1α/SDF1A ELISA Kit

1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖  d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP  質(zhì)量規(guī)格：90.0%,Sigma 大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T

酸性蛋白酶；蛋白酶來自佐氏曲霉  Acidic Protease from Aspergillus   質(zhì)量規(guī)格：BR,50u/mg 人成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)試劑盒 Human FGF4 ELISA kit

撲草凈  Prometryn  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蘿卜硫素；萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulforaphane  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 JM109電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升
地達(dá)諾辛；去羥肌苷  Dideoxyinosine;Didanosine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠前體蛋白(TpP)試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit

淫羊藿苷I  Icariin I;  Icariside I  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素A2(TXA2)試劑盒 Rat Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit

寶藿苷II；大花淫羊藿苷A；意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Baohuoside II  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素B2(TXB2)ELISA檢測試劑盒RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 96T/48T

槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sophoricoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠素B2(TXB2)試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit

槐屬苷  Sophoricoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR 大鼠素合成酶(TXAS)試劑盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit

甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃烷酮A  Methylophiopogonanone A   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit

甲基麥冬黃烷酮B  Methylophiopogonanone B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒RatFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃烷  7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit

6aR,11aR）3-羥基-9，10-二甲氧基紫檀烷  3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit

千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷  Oroxyloside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA檢測試劑盒Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。