PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

人抗原(CCA)ELISAKit     3-(Boc-Amino)  309956-78-3  中文名：  分子式：C10H20N2O2 

人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISAKit     2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde  中文名：  分子式：C19H14FNO  度：98.0%

人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISAKit                 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde  中文名：  分子式：C19H14FNO 

人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAkit     2-Methylanthraquinone  84-54-8  中文名：2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O2 

人基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit     中文名：  分子式：C29H39N5O8  度：98.0%  關鍵詞：
Benzimidazole  51-17-2  中文名：苯并咪唑  分子式：C7H6N2    骨橋蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   規格：   96T   德國 IBL

Benzoin oxime  441-38-3  中文名：安息香肟  分子式：C14H13NO2    OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender

Benzopinacol  464-72-2  中文名：苯頻哪醇  分子式：C26H22O2    Human sP53 Kit   作用：   ELISA   規格：   96T   法國 Diaclone  

5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2    神經營養素 3(-3)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

m-Anisic acid  586-38-9  中文名：間茴香酸  分子式：C8H8O3    神經營養素 4(-4)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒直銷rU亞磷酰胺單體  rU Phosphoramidite  質量規格：>98%,BR 英文名稱RatVitaminB6ELISAKit大鼠維生素B6(VB6)規格：96T/48T

Bz-rA亞磷酰胺單體  Bz-rA Phosphoramidite  質量規格：>98%,BR 烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20

i-bu-rG亞磷酰胺單體  i-bu-rG Phosphoramidite  質量規格：>98%,BR ELISAKitHb-AGE人血紅蛋白晚期糖基化終末產物規格：48T/96T

PF299804（EGFR抑制劑）  Dacomitinib  質量規格：>99%,可用于細胞培養 小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit

Ac-rC亞磷酰胺單體  Ac-rC Phosphoramidite  質量規格：>98%,BR 大鼠黑色素細胞抗體(MCAb)ELISA檢測試劑盒Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T

素(含檸檬酸鹽緩沖液)  Tetrodotoxin  質量規格：>98%,進分 人波形蛋白(VIM)試劑盒 Human vimein ELISA Kit

素粉  Tetrodotoxin  質量規格：>98%,進分 Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規格：96T/48T

AC-DC亞磷酰胺單體  Ac-dC Phosphoramidite  質量規格：>97%,BR MHPG高效液相色譜電化學定量檢測試劑盒20

2,2'-脫水-5-甲基尿苷  2,2'-Anhydro-5-Me-U  質量規格：>97%,BR PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒豬(EPI)ELISA試劑盒規格：96T/48T

7-DEAZA-7--2'-脫氧鳥苷  7-Deaza-7-I-2’-dG  質量規格：>97% 小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒
表兒茶素沒食子酸酯  ECG   質量規格：HPLC≥98%，BR 小鼠彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)ELISA試劑盒 ，英文名： EMILIN2 ELISA Kit

萊苞迪甙A  Rebaudioside A  質量規格：>98%,BR 小鼠蛋白C(PROC)ELISA試劑盒 ，英文名： PROC ELISA Kit

萊苞迪甙A（標準品）  Rebaudioside A  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒 ，英文名： Protein C ELISA Kit

環亮氨酸甲酯鹽酸鹽  Cycloleucine Methyl Ester.HCl  質量規格：>98% 小鼠蛋白p53(TP53)ELISA試劑盒 ，英文名： TP53 ELISA Kit

水溶性四氮唑-3  GLT003  質量規格：BR 小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ，英文名： PROZ ELISA Kit

三新戊醇  Trisbromoneopentyl Alcohol   質量規格：>97% 小鼠蛋白二硫化物異構酶A2(PDIA2)ELISA試劑盒 ，英文名： PDIA2 ELISA Kit

水溶性四氮唑-1  GLT001  質量規格：BR 小鼠蛋白二硫化物異構酶A4(PDIA4)ELISA試劑盒 ，英文名： PDIA4 ELISA Kit

Tricine；三(羥甲基)甲基甘氨酸  Tricine  質量規格：>99% 小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 ，英文名： PKA ELISA Kit

三(羥甲基)甲基甘氨酸（標準品）  Tricine  質量規格：HPLC>99%,日本進口 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

SAR245409 (XL765)  SAR245409 (XL-765)  質量規格：>98%,雙重mTOR/PI3K抑制劑  小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA檢測試劑盒MouseproteinkinaseB,PKBELISAKit 96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。