PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

桿菌(YP)核酸檢測試劑盒   48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名：  分子式：C28H46O2 

噬中性及細胞活化肽 -2(NAP-2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Testosterone isocaproate  中文名：異己酸睪酮  分子式：C25H38O3 

噬酸性粒細胞趨化因子 -2(Eotaxin-2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8  中文名：3-乙酰基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H34O3  度：98.0%   

嗜酸性粒細胞陽離子蛋白   英文名稱：   eosinophil cationic protein   規格：   48T/96T   英文縮寫：   ECP  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3  度：97.0%  關鍵詞：  靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫

嗜酸性粒細胞趨化因子 (Eotaxin)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 Biosource  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%  關鍵詞：  靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫
Marsdenoside F  中文名：  分子式：C39H60O14  度：%  兔固（ALD）ELISA試劑盒  

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒           

Schleicheol 1  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  兔素F2aelisa試劑盒   兔素F2a試劑盒   規格型號：96T/48T   兔素F2a試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔素F2a試劑盒、兔素F2a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Daturametelin I  中文名：  分子式：C34H48O10  度：93.0%  兔素E2elisa試劑盒   兔素E2試劑盒   規格型號：96T/48T   兔素E2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔素E2試劑盒、兔素E2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書可的松(美國進口)  Cortisone  質量規格：>95%,美國進口 大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測試劑盒Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T

柳胺酚,利膽酚(標準品)  2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide  質量規格：>98%,標準品 人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit

柳胺酚,利膽酚  2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide  質量規格：>98%,BR RatTestoterone,TELISAKit大鼠睪同(T)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲磺酸瑞波西汀  Reboxetine mesylate  質量規格：>97% K-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6

酮色林,凱他色林  Ketanserin  質量規格：>98%,BR PlaVitaminB12,VB12ELISA試劑盒植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規格：96T/48T

酮色林,凱他色林(標準品)  Ketanserin  質量規格：HPLC>98%,標準品 小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-8 ELISA Kit

章胺鹽酸鹽；正辛弗林  DL-Octopamine HCl  質量規格：>98% 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA檢測試劑盒Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 96T/48T

舒林酸  Sulindac  質量規格：>98%,BR 人超敏特異性抗原(PSA-U S)試劑盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit

舒林酸(標準品)  Sulindac  質量規格：>98%,標準品 RatTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

托品酸(標準品)  Tropic acid  質量規格：>98% KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
蛋白激酶C（19-36）；蛋白激酶C選擇性抑制蛋白  Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞外基質蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒 ，英文名： ECM1 ELISA Kit

蛋白激酶C（530-558）  Protein Kinase C (530-558)  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞外信號調節激酶(ERK)ELISA試劑盒 ，英文名： ERK ELISA Kit

甲狀旁腺激素相關蛋白拼接同種型3（104-173），人  pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞外信號調節激酶2(ERK2)ELISA試劑盒 ，英文名： ERK2 ELISA Kit

甲狀旁腺激素（13-34），人  pTH (13-34) (human)  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞因子信號轉導抑制因子1(SOCS-1)ELISA試劑盒 ，英文名： SOCS-1 ELISA Kit

甲狀旁腺激素（3-34），牛  pTH (3-34) (bovine)  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒 ，英文名： SOCS3 ELISA Kit

S-I-G-S-L-A-K  S-I-G-S-L-A-K  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒 ，英文名： SOCS-3 ELISA Kit

SAMs肽  SAMs Peptide  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit

猿猴病毒40大抗原氨基段肽段  Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 ，英文名： Cyclin-D1 ELISA Kit

生長抑制素-28  Somatostatin-28  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞周期素D2(CCND2)ELISA試劑盒 ，英文名： CCND2 ELISA Kit

物質P（1-7）  Substance P (1-7)  質量規格：>95%,BR 小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 ，英文名： Cyclin-D2 ELISA Kit
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。