技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒     4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名：4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O 

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S 

松弛素-2   英文名稱：   Human Relaxin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RLN-2  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2  度：98.0%

四硼酸   5kg  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名：  分子式：C11H11NO2  度：98.0%

四甲基聯(lián)   5g  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS  度：98.0%
Estradiol  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2  度：99.0%  兔子樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISAKit  

Estrone  中文名：雌酮  分子式：C18H22O2  度：99.0%  兔子樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISAKit  

Cynatratoside A  中文名：白薇苷A  分子式：C28H40O8  度：98.5%  兔子(INS)ELISAKit              

Sprengerinin A  中文名：  分子式：C38H60O12  度：%  兔色素上皮衍生因子elisa試劑盒   兔色素上皮衍生因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔色素上皮衍生因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Sprengerinin C  中文名：  分子式：C44H70O16  度：98.0%  兔熱休克蛋白90elisa試劑盒   兔熱休克蛋白90試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔熱休克蛋白90試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白90試劑盒、兔熱休克蛋白90 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)甲鈷胺  Mecobalamin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Plagrowthhormone,GHELISA試劑盒植物生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

右旋酮洛芬氨丁三醇  (S)-Ketoprofen trometamol  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 ，英文名： SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit

右旋酮洛芬氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  (S)-Ketoprofen trometamol  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA檢測(cè)試劑盒RatPyruvateKinase,M2-PKELISAKit 96T/48T

植物凝膠(Sigma)  Phytagel  質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分;SigmaP8169 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF-23)試劑盒 Human fibroblast growth factor-23,FGF-23 ELISA Kit

右旋酮洛芬  (S)-(+)-Ketoprofen  質(zhì)量規(guī)格：>98.5% RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-磺基水楊酸  sulfosalicyclic acid  質(zhì)量規(guī)格：AR JM109鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X200微升

1-氨基-2-萘酚-4-磺酸  1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid   質(zhì)量規(guī)格：AR Plahormoneabscisicacid,ABAELISA試劑盒植物激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

利卡西平；10,11-二氫-10-羥基卡馬西平  10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine   質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國(guó)進(jìn)口原裝 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒 ，英文名： SDF1 ELISA Kit

三七皂苷R2(S型)(標(biāo)準(zhǔn)品)  S-Notoginsenoside R2  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%，標(biāo)準(zhǔn)品 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 96T/48T

無(wú)水醋酸鋅  Zinc acetate  質(zhì)量規(guī)格：AR 大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)試劑盒 Rat fibrinogen beta chain ELISA Kit
地奧司明  Diosimin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR 小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒 ，英文名： SCFR ELISA Kit

地膚子皂苷Ic（標(biāo)準(zhǔn)品）  Momordin Ic  質(zhì)量規(guī)格：僅供鑒別用 小鼠抗原B(SSB)ELISA試劑盒 ，英文名： SSB ELISA Kit

地榆皂苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ziyuglycoside I  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒 ，英文名： Hcy ELISA Kit

地榆皂苷II（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ziyuglycoside II  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒 ，英文名： GP73 ELISA Kit

丁香酚（標(biāo)準(zhǔn)品）  Eugenol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-73 ELISA Kit

丁香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Syringic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高分子量激肽原(HMWK)ELISA試劑盒 ，英文名： HMWK ELISA Kit

東莨菪苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Scopolin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit 96T/48T

東莨菪內(nèi)酯  Scopoletin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒 ，英文名： U-TSH ELISA Kit

冬凌草甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Oridonin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠(HDL)ELISA試劑盒 ，英文名： HDL ELISA Kit

豆腐果苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Helicid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠膽(HDL-C)ELISA試劑盒 ，英文名： HDL-C ELISA Kit