PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：棒桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

兔壞死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     4-Chlorotestosterone acetate  中文名：醋酸氯睪酮  分子式：C21H29ClO3 

兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規格型號：96T/48T   兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒、兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  中文名：  分子式：C15H19N3O5  度：98.0%

兔核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒              4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H8N2O4 

兔核因子κ B   英文名稱：   Rabbit Nuclear factor κB   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NFkB  4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名：  分子式：  度：98.0%  關鍵詞： 

兔合酶(rabbit NOS)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  6338-41-6  中文名：5-羥甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4
4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒           

3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  中文名：  分子式：C10H14O5  度：98.0%  兔子白三烯B4(LTB4)ELISAKit   

3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%  兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit  

1,18-Octadecanediol  中文名：  分子式：C18H38O2  度：90.0%  兔子白介素6(IL-6)ELISAKit  

1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  中文名：  分子式：C9H16O6  度：98.5%  兔子白介素4(IL-4)ELISAKit
棒桿菌PCR檢測試劑盒直銷亮綠SF(淡黃)  Light Green SF Yellowish  質量規格：BS Mouseβ-glucuronidase,βGDELISA試劑盒小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒規格：96T/48T

健那綠B  Janus Green B  質量規格：BS 小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA 試劑盒

酸性綠3  Guinea Green B  質量規格：BS，進口原裝 Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒

酸性綠 50   Lissamine™ Green B  質量規格：BS,進口原裝 HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

酸性綠A  Acid Green A  質量規格：BS,>97%,進口分裝 Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規格：96T/48T

吲哚菁綠  Indocyanine Green  質量規格：>94%,BS 植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感比色法定量檢測試劑盒20

靛藍  Indigotin  質量規格：BS HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲基藍  Methyl blue  質量規格：AR 小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF9 ELISA Kit

伊文思藍；埃文斯藍  Evans Blue  質量規格：BS,進分BIOFER,>85% 雞補體3裂解產物(C3SP)ELISA檢測試劑盒ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 96T/48T

曲利苯藍  Trypan Blue  質量規格：BS 人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)試劑盒 Human Procollagen Ⅲ C-terminal Peptide,PⅢCP ELISA Kit
二咖啡酰菊苣酸 HPLC≥98% 20mg CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

二羥丙茶堿E HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25

二氫草莓酸 HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白共沉淀分析試劑盒5

二氫丹參酮I HPLC≥98% 20mg COLLAGENI蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25

二氫膽 HPLC≥98% 200mg COLLAGENI蛋白共沉淀分析試劑盒5

二氫膽 HPLC≥98% 20mg Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20

二氫黃連堿 HPLC≥98% 20mg CRASP基因甲基化程度定量分析試劑盒20

二氫姜黃素 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25

二氫辣椒堿 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白共沉淀分析試劑盒5

二氫辣椒素酯 HPLC≥98% 10mg CTLA-4/CD152人細胞毒性T細胞相關抗原4規格：48T/96T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。