技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：泰澤隱孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
兔球蛋白M(rabbit IgM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Benzoyloxy-2-azetidinone  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮  分子式：C10H9NO3  度：98.0%

兔球蛋白G(rabbit IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Benzyl L-aspartate  2177-63-1  中文名：L-天冬氨酸-4-芐酯  分子式：C11H13NO4 

兔球蛋白E(rabbit IgE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     4-Benzoyloxy-2-azetidinone  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮  分子式：C10H9NO3 

兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3elisa試劑盒   兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒、兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：5-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%

兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit                 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S
3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  中文名：  分子式：C10H10O3  度：97.0%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒  

alpha-Terthienylmethanol  中文名：  分子式：C13H10OS3  度：%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒  

Eleutheroside C  中文名：  分子式：C8H16O6  度：97.5%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒  

Catalpalactone  中文名：  分子式：C15H14O4  度：%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒           

Catalponol  中文名：  分子式：C15H18O2  度：98.0%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISAKit
泰澤隱孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷CBZ-D-纈氨酸  N-Cbz-D-valine  質(zhì)量規(guī)格：0.98 RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Z-Arg(Mtr)-OH·CHA  Z-Arg(Mtr)-OH·CHA  質(zhì)量規(guī)格：0.98 HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2

CBZ-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽  H-Lys(Z)-OMe hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% MouseαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISA試劑盒小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-CBZ-D-丙氨酸  Z-D-Ala-OH  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA 試劑盒

BOC-L-丙氨酸  Boc-L-alanine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Rat perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒

BOC-L-苯丙氨酸  Boc-L-phenylalanine  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

BOC-甘氨酸  Boc-Glycine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISA試劑盒人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BOC-L-異亮氨酸  Boc-Ile-OH  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 植物活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10

BOC-L-脯氨酸  Boc-Pro-OH  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR Humanα2macroglobulin,α2MGELISAKit人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BOC-L-色氨酸  Boc-Trp-OH  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 小鼠角蛋白9(K9)ELISA試劑盒 ，英文名： K9 ELISA Kit
伐地那非-d5  Vardenafil-d5  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物種子活性葉綠體分離試劑盒20

鹽酸貝他定  Bestatin hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3

N-去甲基二鹽酸三氟拉嗪  N-Desmethyl Trifluoperazine Dihydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總RNA化試劑盒(低多糖/酚)20

雙硫侖-d20  Disulfiram-d20  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20

脫氧膽酸鈉鹽  Deoxycholic Acid,  Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總氨基酸含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20

一水脫氧膽酸鈉   deoxycholate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測(cè)試劑盒20

雷米普利拉-d5  Ramiprilat-d5  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總淀粉生物酶比色法定量檢測(cè)試劑盒20

雷米普利-d3   Ramipril-d3  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20

雷米普利拉  Ramiprilat  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總糖蛋白樹脂法化試劑盒5

甲基4,7,8,9-四-O-乙酰-2-硫代-N-乙酰-a-D-神經(jīng)氨酸甲酯  Methyl4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2-thio-N-acetyl-a-D-neuraminic acidmethylester  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 植物總吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測(cè)試劑盒(包括萃取)20