PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit     6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%   

兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit     6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%   

兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S 

兔子C反應蛋白(CRP)ELISAKit     9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2
Perospirone hydrochloride  中文名：鹽酸哌羅匹隆  分子式：C23H31ClN4O2S  度：98.0%  兔血清總補體(CH50)ELISAKit  

   中文名：枸櫞酸  分子式：C28H38N6O11S  度：98.0%  兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit  

Amlexanox  中文名：氨來呫諾  分子式：C16H14N2O4  度：98.0%  兔誘導型合成酶(iNOS)ELISAKit               

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%  兔子孕激素elisa試劑盒   兔子孕激素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子孕激素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Glyburide  中文名：格列本脲  分子式：C23H28ClN3O5S  度：98.0%  兔子樣生長因子1elisa試劑盒   兔子樣生長因子1試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子樣生長因子1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子樣生長因子1試劑盒、兔子樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒供應L-天冬酰胺，無水物（標準品）  L-Asparagine Anhydrous  質量規格：HPLC≥98%，標準品 MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA試劑盒小鼠β(TNF-β)ELISA試劑盒規格：96T/48T

L-天冬素/L-天冬酰胺  L-Asparagine anhydrous  質量規格：>99%,BR,無水物 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 ，英文名： α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit

N'-（三苯甲基）-L-天冬酰胺  N'-Trityl-L-asparagine  質量規格：>98%,BR 大鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T

L-天冬氨酸-1-芐酯  L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester  質量規格：>98%,BR 人帶3蛋白(Band3)試劑盒 Human Band3 protein ELISA kit

L-天門冬氨酸1-甲酯  L-Aspartic acid 1-methyl ester  質量規格：>98%,BR Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit大鼠特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽  L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride  質量規格：0.98 HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

S-甲基-L-半胱氨酸  S-Methyl-L-cysteine  質量規格：98%，進口分包 MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA試劑盒小鼠特異生長因子/相關因子(TGSF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

S-三苯甲基-L-半胱氨酸  S-Trityl-L-cysteine  質量規格：>98% 小鼠抗Smith抗體(Sm)ELISA試劑盒 ，英文名： Sm ELISA Kit

L-谷氨酸1-甲酯  L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester  質量規格：0.97 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T

L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽  L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride  質量規格：0.97 人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒 Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit
富馬酸 HPLC≥98% 20mg DNA產物去鐵化試劑盒20

覆盆子酮 HPLC≥98% 20mg DNA橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒50

覆盆子酮葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg DNA定向連接克隆完全試劑盒(包括雙內切酶)10

伽升沃 C HPLC≥98% 20mg DNA合成1樣本

伽升沃 D HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶(DNMT)總活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20

甘草查爾酮A HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶-1(DNMT-1)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20

甘草查爾酮B HPLC≥98% 10mg DNA甲基轉移酶-3A(DNMT-3A)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20

甘草查爾酮C HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉移酶-3B(DNMT-3B)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20

甘草酸(β型）  HPLC≥98% 20mg DNA末端平滑補缺同位素([35S]dATP)聚合酶標記試劑盒20

甘草酸十八酯 HPLC≥98% 20mg DNA南方雜交印跡消除試劑盒20
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。