PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒              8-Azaguanine  中文名：8-氮雜鳥嘌呤  分子式：C4H4N6O 

兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit     8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2  度：98.0%

兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone  58113-30-7  中文名：  分子式：C12H15ClO3  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO  度：98.0%

兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒     8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  關鍵詞：  ; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
Iloperidone  中文名：伊潘立酮  分子式：C24H27FN2O4  度：98.0%  Cellulose,Microcrystalline   100g

4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride  中文名：甲磺酸伊馬替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2  度：98.0%  頭孢芐   1g

4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  中文名：  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  Cephalexinmonohydrate   5g              

N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide  中文名：  分子式：C11H9NO3  度：98.0%  晚期氧化蛋白產物 (AOPP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S  度：98.0%  轉錄因子 AP-1(AP-1)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒直銷藍[pH指示劑]  Bromochlorophenol Blue  質量規格：pH指示劑 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T

乙基橙[pH指示劑]  Ethyl Orange  質量規格：pH指示劑 大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit

4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))  4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride  質量規格：>95.0%(T) 英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯素(adiponectin)ELISAKit規格：96T/48T

DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑  DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]  質量規格：用于蛋白質組分析，用于高效液相色譜標記，熒光染料，用于質譜的衍生化試劑 高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20

2,3-萘二醛(>99.0%(GC))  2,3-Naphthalenedialdehyde  質量規格：>99.0%(GC) ELISAKitf-Hb人游離血紅蛋白規格：48T/96T

DBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))  DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]   質量規格：>98.0%(HPLC) 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 ，英文名： Gzms-B ELISA Kit

N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC))  N-(1-Pyrenyl)maleimide  質量規格：>97.0%(HPLC) 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T

愛維莫潘  Alvimopan  質量規格：刪除；精神管制 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒 Human protein kinase C,PKC ELISA Kit

3-磺炳基十四烷基二甲甜菜堿  Myristyl sulfobetaine  質量規格：>98.0%,BR RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

3-磺炳基十六烷基二甲甜菜堿  3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB)  質量規格：>98%,BR GMS15重組腺病毒載體繁殖超級化學感受態細菌5X100微升
固深紅 GBC  Fast Garnet GBC Salt  質量規格：BS,90% 人解整合素樣金屬蛋白酶15(ADAM15)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit

固紅 3 GL  Fast Red 3 GL Salt  質量規格：BS 人解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit

固紅 KL鹽  Fast Red KL Salt  質量規格：BS 人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit

固紅B  Fast Red B Salt  質量規格：>90% 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit

固紅-萘磺酸 TR  Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt  質量規格：≥90%(TLC) 人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit

麗春紅S  Ponceau S  質量規格：BS 人金葡菌腸(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit 96T/48T

環丙貝特  Ciprofibrate  質量規格：>98%,BR 人金屬硫蛋白(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMetallothionein,MTELISAKit 96T/48T

曙紅Y(水溶)  Eosin Y water solution  質量規格：BS 人金屬硫蛋白(MT)試劑盒 Human MT ELISA Kit

偶氮胭脂紅B  Azocarmine B  質量規格：IND 人金屬硫蛋白2(MT-2)試劑盒 Human MT-2 ELISA Kit

偶氮胭脂紅G  Azocarmine G  質量規格：BS 人金屬肽酶含血小板反應蛋白1(ADAMTS1)試劑盒 Human ADAMTS1 ELISA kit
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。