【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 蝦肝腸微胞蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱(chēng)】: Enterocytozoon hepatopenaei（EHP）PCR
【貨號(hào)】: BKP3634

【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

蝦肝腸微胞蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

SAC-II C3細(xì)胞，小鼠腹水瘤細(xì)胞 NRK(大鼠腎細(xì)胞) 人胚胎膀胱組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HB-2葡聚糖凝膠S-100HRshēng huà shì jì容量：100U

CCL1 Protein Mouse 重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)哌拉西林鈉 Piperacillin  salt,≥99% 59703-84-3 1G 通用試劑

RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SIM培養(yǎng)基 xy7nogqn Sulfidq Indolq Motility Mqdium

化大家鼠;NRmVitaminAacetate醋酸維生素A1克IND

人微內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMEC)( 5×105 )123-25-1丁二酸二乙酯Dietxyl succinate
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHL乙硫異煙胺,硫異煙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）amide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人髓核細(xì)胞(HNPC)(5×105)依曲韋林Etravirine質(zhì)量規(guī)格：>98%

CL-0083FaDu(人咽鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2法莫替丁Famotidine質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠細(xì)胞;GT1-1 大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL法莫替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)Famotidine質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

BIU-87/Adr 人阿霉素耐藥株非布索坦Febuxostat質(zhì)量規(guī)格：≥99%
人急性母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4布地奈德（標(biāo)準(zhǔn)品）Budesonide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞葉酸鈣Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格：>98%，水合物,BR

CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL亞葉酸鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格：>98%,含量測(cè)定

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)喜樹(shù)堿Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：> 99%,喜樹(shù)提取

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11喜樹(shù)堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
蝦肝腸微胞蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人胚腎細(xì)胞;2V6.11AntibodySignalEnhancer抗體信號(hào)增強(qiáng)劑蛋白組學(xué)級(jí)透明液體，搖晃時(shí)有氣泡RTsigma

IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-β本炳安醋 3-cmino-3-phqnylpropionic ccid 614-19-7

人膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLL-ASCORBICACID抗壞血酸(維生素C)美國(guó)藥典級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

H22細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 Neuro-2A(腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY09091-辛烷磺酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium 1-octanesulfonate，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：100克

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽)102-25-01.3.5-三乙基本1,3,5-TRIetxylBENZENE
PCR檢測(cè)試劑盒

蝦肝腸微胞蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。