技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：耐久腸球菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖連蛋白(人血)，英文名或英文縮寫：CIG，級別：超，98%，規格：500克

海馬神經元細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)巴豆醋;β-基炳1醋;亞基醋;2-醋(反式);1-羧基炳1;α-醋 Crotoni ccid;α-Crotoni ccid;β-Mqthylccrylic ccid;Solid crotoni ccid;1-Ccrboxypropylqnq;α-Butqnic ccid 107-93-7

PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 人細胞裂解液 (陽性對照) MOLYBDICACIDwo7iumSALTDIHYDRATE鉬酸鈉二水ACS級白色至微黃色結晶粉末RTsigma

大鼠內皮細胞完全培養基 100mL木糖，英文名或英文縮寫：D-Xylose，級別：超，97%，規格：5毫克

RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞細胞 RBL-2H3 rat neuophils alkaline cell leukemia MEM培養基(GIBCO)+15%熱滅活FBS(錄靛酚鈉)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙二醇雙[4-(乙氧羰基)苯基](>98.0%(GC))Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether質量規格：>98.0%(GC)

FRhK-4細胞，恒河猴胚腎細胞 人胚胎胰腺組織來源細胞,CCC-HPE-2細胞 CM-M064小鼠上皮細胞完全培養基100mL乙二醇雙(4-羧苯基)(>95.0%(T))Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether質量規格：>95.0%(T)

大鼠癌細胞;MADB1069,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene質量規格：>98.0%(GC)

IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人細胞裂解液 (陽性對照) pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11質量規格：>98.0%(T)

脂肪細胞生長添加物PAGS苯均四酸(>98.0%(T))Pyromellitic Acid質量規格：>98.0%(T)
耐久腸球菌PCR檢測試劑盒直銷CM-R002大鼠肺平滑肌細胞完全培養基100mL丙磺舒（標準品）Probenecid質量規格：>98%,標準品

NCI-N87細胞，人胃腺癌細胞 人跟細胞,Hp2/o細胞 草魚腎細胞;GIK諾氟沙星Norfloxacin質量規格：>99,USP,BR,可用于細胞培養

DH82(犬巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2諾氟沙星（標準品）Norfloxacin質量規格：HPLC>98%,標準品

CA9 Others Human 人 CAIX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) 諾氟沙星鹽酸鹽Norfloxacin HCl質量規格：含量大于98.5%

人滑膜細胞總RNAHS NA諾氟沙星鹽酸鹽（標準品）Norfloxacin HCl質量規格：HPLC>98%,標準品
A9細胞，皮下結締組織細胞 人肝星形細胞正常,LX-2細胞 CL-0088H4-IIE(大鼠細胞 )5×106cells/瓶×25-尿苷質量規格：>99%,BR5-Iodo-Uridine

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-215--2'-脫氧尿苷(苷)質量規格：>98%,BR5-Iodo-deoxyuridine

FCN1 Others Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5--2'-脫氧胞苷質量規格：>98%,BR5-Iodo-deoxycytidine

神經元細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)2'-甲氧基尿苷質量規格：>98%,BR2’-OMe Uridine

NA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) TES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉質量規格：>99%,ARTES