技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：產腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
SUNE-1亞株13-9B細胞，人細胞系 小鼠胚胎成纖維細胞,BALB/3T3 clone A31細胞 CM-H063人腎皮層上皮細胞完全培養基100mLPOPSO,FREEACIDPOPSO生物技術級白色粉末RTsigma

OP9(小鼠骨髓基質細胞) 5×106cells/瓶×2雙琥珀酰亞安忻二醋酯磺醋內鹽 ≥95% (H-NMR)(-20°C) BS3 8436-77-9

Promocell C-27020 Osteoblast MineralizationMedium, 成骨細胞礦化培養基(即用型) 500ml5,5'-二硫雙-(2-硝... 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), ... 69-78-3 1G 染色劑

肝實質細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)氧合血紅蛋白，英文名或英文縮寫：Oxyhemoglobin，級別：BR，98%，規格：1克

PRKD2 Others Human 人 PRKD2 / PKD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (亞油酸)
長尾綠猴腎細胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide質量規格：>99%,EP

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氯化鎂六水(分子生物學)Magnesium chloride, hexahydrate質量規格：>99%,分子生物學級

CL-0217SP2/0(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate質量規格：>98%,BC

LX-2, 人肝星形細胞株 小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)神經氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens質量規格：≥10 units/ mg

人腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate質量規格：>98%,BC
產腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒直銷人細胞;HOS苯扎氯銨（標準品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride質量規格：供HPLC法檢查用和容量法含量測定用

人成纖維細胞(HMF)(5×105)苯扎氯銨（標準品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride質量規格：含量測定用

CM-H112人脂肪細胞完全培養基100mL甲硫酸新斯的明(標準品)Neostigmine methyl sulfate質量規格：HPLC>99%,標準品

小鼠漿細胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細胞完全培養基 100mL甘草酸二鉀（標準品）Dipotassium glycyrrhizinate質量規格：含量測定

rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 Rattus尼美舒利（標準品）Nimesulide質量規格：含量測定
293T細胞，人胚腎T細胞 人細胞,HO-8910細胞 人心肌細胞裂解物HCML戈米辛D(標準品)質量規格：＞98.0% (LC&T)，標準品Gomisin D

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-11-甲基質量規格：>98%1-Methyl Xanthine

IFNA5 Others Human 人 IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-羧基-X-羅丹明質量規格：>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX

豚鼠皮膚細胞;GP-S2西侖吉肽質量規格：>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細胞裂解液 (陽性對照) 柴胡皂苷B2（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Saikosaponin B2