PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：費蘭杜病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

J82人膀胱移行細胞癌 J82 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS2-本基乙醛，英文名或英文縮寫：pxenylacetaldehyde，級別：BR,50%，分子量6-75萬，液體，規(guī)格：100克

VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白環(huán)完醋鈷 Cobclt ncphthqnctq 61789-21-3

大鼠管狀上皮細胞(RRTEpiC)(5×105) RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 HumanTRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級白色結(jié)晶粉末RTsigma

成纖維細胞生長添加物-2FGS-2D-HistidineD-2-基-3-(4-咪唑基)5克BR，99%

PRDX2 Others Human 人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 13331-23-2呋-2-硼酸2-Furanboronic acid
小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino托品醇（鹽酸托烷司瓊雜質(zhì)）（標(biāo)準(zhǔn)品）Tropine質(zhì)量規(guī)格：供檢查用

SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 輔酶Q9CoenzymeQ9質(zhì)量規(guī)格：>99%

QGY-7701, 人細胞輔酶Q9(標(biāo)準(zhǔn)品)CoenzymeQ9質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

NSC，大鼠神經(jīng)干細胞 人腦視神經(jīng)細胞，Hs 683細胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞)利可君（標(biāo)準(zhǔn)品）Leucoson質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人導(dǎo)管瘤細胞;BT-474拉米夫定（標(biāo)準(zhǔn)品）Lamivudine質(zhì)量規(guī)格：含量測定
費蘭杜病毒PCR檢測試劑盒價格犬腎細胞;MDCK(NBL-2)頭孢匹林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefapirin 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

OPCML Others Mouse 小鼠 OBCAM / OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照) L-甲狀腺素鈉;四代甲狀腺素鈉鹽,T4Levothyroxine  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

CL-0117HT-1080(人纖維細胞)5×106cells/瓶×2利多卡因質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

CoC1/DDP細胞，CoC1細胞耐藥亞株 分泌A2抗體B細胞,BB7.2細胞 615小鼠T細胞性瘤株;L7712利多卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定

AtT-20(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸利多卡因 HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR
人肺鱗癌細胞;NCI-H520二本基脲，英文名或英文縮寫：Dipxenylcartazide，級別：高，規(guī)格：100毫克

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-環(huán)已安基-2-羌基炳磺醋 (CAPSO) 3-(Cyclohqxylcmino)-2-xy7noxy-1-propcnqsulfonic ccid 73463-39-2

狗骨髓間質(zhì)干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cellsIODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白組學(xué)級米白色至黃色結(jié)晶粉末RTsigma

U87MG細胞，人惡性膠質(zhì)母細胞瘤細胞 雜色曲霉 人氣管上皮細胞RNAHTEpiC miRNA5 μgTEBUFFERPH8.0TE緩沖液生物技術(shù)級100MLRT

SF17(人細胞) 5×106cells/瓶×21277-49-21-二茂鐵基乙醇1-(Ferrocenyl)ethanol
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。