【產品名稱】: 土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Francisella tularensisPCR
【貨號】: BKP3710

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

HEC-1-B細胞，人子宮內膜腺癌細胞 大鼠腦膜細胞,RMC細胞 組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1mlZ-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F

H22(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2玫瑰紅6G Bcsic Rqd 1 989-38-8

HWP visceral Pellet 人類內臟白前脂肪細胞團塊 > 1 mio.cells 人真皮微內皮細胞總RNAHDMEC NAMOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技術級100 gFrozen

T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸-L-白酰-2-奈胺100克

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照) Percoll 100ml/1L 原裝 Pharmacia17089101
小腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胃泌素釋放肽，豬Gastrin Releasing Peptide,procine質量規格：>95%,BR

SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃泌素釋放肽-Lys（生物素），人Gastrin Releasing Peptide-Lys(Biotin), human質量規格：>95%,BR

大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5胃饑餓素，人Ghrelin (human)質量規格：>95%,BR

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7 表皮癌細胞，A-431細胞 H22-H8D8細胞，鼠細胞生長激素釋放因子，大鼠GHRF, rat質量規格：>95%,BR

人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1生長激素釋放因子（1-44），人GHRF (1-44), human質量規格：>95%,BR
腦成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)頭孢替坦Cefotetan acid 質量規格：Potency>960 mg,JP

PILRA Others Human 人 PILR-alpha / PILRA 人細胞裂解液 (陽性對照) AZD8055AZD-8055 質量規格：>98%,ATP競爭性的mTOR抑制劑

小鼠細胞;Fox-NYAlectinib；CH5424802CH5424802 質量規格：>98%,ALK抑制劑

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163 瘤細胞，YAC-1細胞 RSMC細胞，大鼠主動脈平滑肌細胞對甲氧基肉桂酸p-Methoxycinnamic acid 質量規格：AR,99%

人肺細胞;HLF-a5-羥基色胺鹽酸鹽,血清胺鹽酸鹽Serotonin hydrochloride(5-HT)質量規格：>97%,BR
土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒說明書人細胞;SF17對本基酚，英文名或英文縮寫：4-xy7noxybipxenyl，級別：CP，95%，規格：500克

雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7 急性母細胞細胞，MOLT-4細胞 H9c2(2-1)細胞，大鼠心肌細胞二醋6-羧基熒光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6

C6, 大鼠腦細胞 Rattus6,6-二甲基-2-亞甲基-二環[3.1.1]-庚烷，英文名或英文縮寫：β-Pinen，級別：BR，規格：25克

CD97 Others Human 人 CD97 人細胞裂解液 (陽性對照) 百里酚酞

尿道上皮細胞培養基UCM(2-羥基磺酸))
PCR檢測試劑盒

土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。