PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：擬枝孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

HK-2細胞，人腎小管近段上皮細胞 負鼠腎細胞,OK細胞 CL-0389NCI-H1688(人典型小細胞細胞)5×106cells/瓶×2GLYCEROL甘油蛋白組學級無色至幾乎無色粘稠液體RTsigma

CAL-27(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2煙酰安腺嘌呤雙核苷醋 BqTc-NICOTINcMIDq cDqNINq DINUCLqOTIDq 23-84-9

HCM-c 人類心肌細胞 500,000cells 人肺動脈平滑肌細胞HPASMC中性紅 (高) Neutral Red (Dye content, >90%) 553-24-2 1G 染色劑

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系β-D-葡萄糖-6-嶙酸鈉鹽，英文名或英文縮寫：G-6-P-Na，級別：高，98%，規格：100毫克

IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-pxenylalanine 25g/100g/250g/500g 國產
豚鼠胚胎細胞;104C1噻奈普汀鈉鹽Tianeptine  salt質量規格：>98%,BR

FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人細胞裂解液 (陽性對照) D-谷氨酰胺D-Glutamine 質量規格：0.98

人成纖維細胞完全培養基 100mL扎托布洛芬Zaltoprofen質量規格：>98%

HaCaT細胞，人正常皮膚細胞 柰瑟氏菌 小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定過表達);DG6-VAP33-GFP甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉 Glycocholate Hydrate質量規格：>98%

CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標簽)甘露醇；D-甘露糖醇Mannitol；D-Mannitol質量規格：>99%,BR
擬枝孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲基索拉菲尼-d3Sorafenib-methyl-d3質量規格：美國進口

FGF2 Others Human 人 VEGF121 / VEGF-A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫康唑Sulconazole質量規格：美國進口

人非小細胞;NCI-H20876-羥基6-Hydroxycoumarin質量規格：>98%(GC);進分

CCD-1095Sk細胞，皮膚細胞 人細胞,HHCC細胞 CL-0176OP9(小鼠骨髓基質細胞)5×106cells/瓶×2甘氨石膽酸(GLCA)Lithocholylglycine質量規格：美國原裝進口

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21匹卡米隆Pikamilone質量規格：>98%,BR
人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E2-疊氮腺苷質量規格：美國進口2-Azido Adenosine

CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2',3'-亞異丙基腺苷質量規格：美國進口2',3'-Isopropylidene Adenosine

人胰腺導管癌細胞;CFPAC-12-代-5'-乙基酰胺基腺苷質量規格：美國進口2-Iodo-5'-ethylcarboxamido Adenosine

ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 瑞加德質量規格：美國進口Regadenoson 

CoC1(懸浮) 5-氨基水楊酸,美沙拉秦質量規格：>98%,BR5-Aminosalicylic acid
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。