PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：腸賈第蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

IL10RB Others Human 人 IL10Rb 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 半固體瓊脂shēng huà shì jì容量：500毫升

KM小鼠子瘤株;U272-酚芐基迷 2-(Phqnylmqthoxy)-ncphclqnq 613-6-7

SPG21 Others Mouse 小鼠 SPG21 / ACP33 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 錄化亞錫shēng huà shì jì容量：100克

CM-M025小鼠外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰-L-酪酸乙酯shēng huà shì jì容量：RT5克

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人細(xì)胞 癌細(xì)胞,MDA-MB-157細(xì)胞 Ana-1(鼠巨噬細(xì)胞)301　紅色釉化擔(dān)體NA
腎近曲管狀上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)無(wú)水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm) sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm

白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF 人成纖維細(xì)胞，Hs 578T細(xì)胞 Acc-3(涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞)甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfometuron-methyl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%)Simetryne質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%

GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)Quizalofop-ethyl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7精喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%)Quizalofop-p-ethyl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%
腸賈第蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格F81 貓腎細(xì)胞4-酮基13-順式-視黃酸4-Keto 13-cis-Retinoic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-酮基9-順式視黃酸4-Keto 9-cis Retinoic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系4-叔丁基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4-tert-Butylphthalonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(N)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0905 胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-丁氧基鄰苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Butoxyphthalonitrile質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM1,3-二亞氨基異吲哚啉(>98.0%(T))1,3-Diiminoisoindoline質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
QGY-7703細(xì)胞，細(xì)胞 表皮癌細(xì)胞系,A431細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076PBSBUFFERWITH0.05%TWEEN20,pH7.4PBS溶液含0.05% 吐溫20蛋白組學(xué)級(jí)白色顆粒粉末RTsigma

小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));DG6-VAP33-GFP甜菜減;甘安醋三安內(nèi)鹽;三銨內(nèi)鹽 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7

CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲基紅 Methyl Red (pH indicator, pH 4.4 to 6.0) 493-52-7 5G 染色劑

人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞裂解物HBdSFL葡甲，英文名或英文縮寫(xiě)：Meglumine，級(jí)別：高，98%，規(guī)格：5毫克

VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-Serine 25g/100g/250g/500g 國(guó)產(chǎn)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。