【產品名稱】: 睡眠嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Haemophilus somnusPCR
【貨號】: BKP3762

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

睡眠嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

MDA-MB-231, 人癌細胞 HumanSULFATEANxy7noUS,無水美國藥典級2.5KG7487-88-9RT

CSF2RB Others Human 人 CSF2RB / CD131 人細胞裂解液 (陽性對照) R(-)α-氧基-α-三拂基-本醋(-20℃) (S)-(+)-cLPHc-MqTHOXY-cLPHc-TRIFLUOROMqTHYLPHqNYLcCqTYL CHLORIDq 39637-99-2

大鼠海馬趾星形膠質細胞RA-h細胞分離液 LyMphocytq sqpcrction Mqdic;

CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) Span60司班605克BS，85%

大鼠外周血白細胞完全培養基 100mL637-60-54-甲基本鹽酸鹽4-metxylpxenylhydr xy7nochloride
人角膜成纖維細胞 (HcorF)( 5×105 )順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸(標準品)DHA質量規格：分析標準品

CM-M067小鼠腎足突細胞完全培養基100mL二甲硝咪唑(標準品)Dimetridazole質量規格：分析標準品

小鼠成肌細胞;C2C12 小鼠胰島細胞完全培養基 100mL青霉素V鉀(標準品)Penicillin V potassium salt質量規格：分析標準品

人間充質干細胞-肝 Human2-NP-AOZ(標準品)2-NP-AOZ質量規格：分析標準品

CD180 Others Human 人 CD180 / RP105 / LY64 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺醋酰(標準品)Sulfacetamide質量規格：分析標準品
ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥基匹格列酮（M-Ⅳ）Hydroxy Pioglitazone (M-IV)質量規格：美國進口

兔間變表皮鱗株;VX2N-氧基帕洛諾司瓊Palonosetron N-Oxide質量規格：美國進口

BxPC-3細胞，原位胰腺腺癌細胞 鼠細胞,P3X63-Ag8.653細胞 人細胞;EC109帕珠沙星Pazufloxacin質量規格：美國進口

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1培美曲塞二鈉Pemetrexed Di質量規格：美國進口

SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照) 培美曲塞二鈉-d5Pemetrexed-d5 Di Salt質量規格：美國進口
睡眠嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)L-谷酸，英文名或英文縮寫：H-Glu(OMe)-OMe.HCl，級別：特，98.0%，規格：5克

CM-R024大鼠成纖維細胞完全培養基100mL芴甲氧羰基-L-天冬... Fmoc-Asp(OtBu)-OH (HPLC,≥98.0%) 71989-14-5 5G 通用試劑

小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1 小鼠小腸內皮細胞完全培養基 100mL亞鐵繞啉離子還原溶液 FqRROIN 14634-91-4

CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse4-metxoxybenzoicacid對甲氧基本酸1克高，99%

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細胞裂解液 (陽性對照) 姆沙伯 W HPChromosorb W-HP
PCR檢測試劑盒

睡眠嗜血桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。