本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 漢坦病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Hantanvirus(HTV)RTPCR
【貨號】: BKP3766
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

漢坦病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)扶化氫shēng huà shì jì容量：500克

FCGR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-青基;異煙醋晴;醋-4-晴 4-Cycnopyridinq;4-Pyridinqccrbonitnilq;Isonicotinonitnilq 100-48-1

HBMEC 人腦微內皮細胞多價蛋白胨-酵母膏培養基shēng huà shì jì容量：100克

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1氣單胞菌培養基基礎50張/盒

lovo, 人細胞Urea 250g/500g/1kg/5kg 原裝 Sigma U0631
人骨髓間充質干細胞(hMSCs) 人細胞，Hep G2細胞 C127(細胞)異煙酸Isonicotinic acid質量規格：>98%,BR

人癌細胞;MDA-MB-157L-蘋果酸L-Malic acid質量規格：>98%,BR

BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K溶液(20 mg/ml)Proteinase K Solution, 20 mg/ml質量規格：20 mg/ml

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1多聚賴氨酸0.1%溶液Poly-L-lysine solution ( 0.1%)質量規格：M.W:150,000~300,000

VRK1 Others Human 人 VRK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸四環素溶液,50 mg/mlTetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterile質量規格：50 mg/ml,滅菌裝
漢坦病毒通用PCR檢測試劑盒說明書CM-R011大鼠肺大動脈內皮細胞完全培養基100mL川續斷皂苷乙（標準品）Dipsacoside B質量規格：HPLC≥98%，標準品

MiaPaCa-2, 人細胞野鳶尾黃素（標準品）Irisflorentin質量規格：HPLC≥98%，標準品

EB病毒轉化的人B細胞;KMY1036 人神經小膠質細胞完全培養基 100mL刺芒柄花苷（標準品）Ononin質量規格：HPLC≥98%，標準品

人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA刺五加苷E（標準品）Eleutheroside E質量規格：HPLC≥98%，標準品

THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 刺五加皂苷B（標準品）Ciwujianoside B質量規格：HPLC≥98%，標準品
獼猴皮膚細胞;MMS7BOC-D-pxenylalanineN-叔丁氧羰基-D-本酸25克BR，99%

LOVE1細胞，結細胞 人色素瘤細胞,B16細胞 EB病毒轉化的人B細胞;HH-29頭孢克1 (anxy7nous) CqfixiMq 79320-37-1

HCC827(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2TrackingDye-2D雙向電泳指示劑1克BR

ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照) TYGPNMEDIUMBROTHTYGPN 培養基肉湯生物技術級500GRT

人肝細胞;HL-7702[L-02](腺苷)

PCR檢測試劑盒：

漢坦病毒通用PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。