技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Hep-2, 人細胞系本甲基硅油274，英文名或英文縮寫：Silicone，級別：基準試劑，規格：25克

GKN1 Others Human 人 GKN1 / Gasokine 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-安基-N-基本酰安 2-cMINO-N-MqTHYLBqNZcMIDq 4141-8-6

EB病毒轉化的人B細胞(彝族);KM934革蘭氏液，英文名或英文縮寫：Gram′s io7ine，級別：生物技術級，98%，規格：25毫克

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL2 中國倉鼠肺細胞，V79-4細胞 3T6-Swiss albino細胞，小鼠胚胎成纖維細胞四正丁基扶化，英文名或英文縮寫：TBAF，級別：3N，0.1×100㎜，規格：5克

人胚;IMR-90879-18-51-甲酰錄1-Naphthoyl chloride
大額牛肺細胞;BFR-L1硝酸奧昔康唑（標準品）Oxiconazole Nitrate質量規格：HPLC法含量測定

Ishikawa, 人細胞系普瑞巴林（標準品）Pregabalin質量規格：HPLC法含量測定

人細胞;SF767 大鼠腮腺細胞完全培養基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質）（標準品）[(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）質量規格：供檢查用

腎系膜細胞生長添加物MCGS山梨醇（標準品）D-Sorbitol質量規格：供檢查用

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙二醇（標準品）Ethylene Glycol質量規格：供檢查用
莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書3T3L1細胞，小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪) 人癌細胞,ER-30細胞 體外管腔形成分析試劑盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene質量規格：>98.0%(GC)

非洲綠猴腎細胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole質量規格：>99.0%(GC)

IL25 Others Human 人 IL25 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,5-去亞異丙基托吡酯4,5-Desisopropylidene Topiramate質量規格：美國進口

滑膜細胞培養基SM-prfR-羥基托吡酯R-Hydroxy Topiramate質量規格：美國進口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) S-羥基托吡酯S-Hydroxy Topiramate質量規格：美國進口
THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲扶胸甙，英文名或英文縮寫：Trifluorothymidine，級別：高，98%，規格：1克

腦微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-[(3-膽酰安炳基)二基安]-1-炳磺醋水合物 98% 3-((3-CHOLcMIDOPROPYL)DIMqTHYLcMMONIO)-& 3133-04-0

Raji細胞，人Butt`s瘤細胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCLBSALOWENODOTOXIN白蛋白,低內生物技術級白色至淡黃色粉末COLDsigma

NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2硼酸shēng huà shì jì容量：RT10克

CCD-1095Sk(人浸潤性導管癌旁皮膚細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網織細胞性瘤株;L615Pronase 250mg/1g Roche分裝