PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：人病毒12PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

腸微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)L-ASCORBICACID,FREEACID抗壞血酸(維生素C)ACS級白色精細結晶粉末RTsigma

C1QB Others Human 人 C1QB / C1qB 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 酰氧1醋 ccqtoxy7noxcMic ccid 246-88-3

人癌細胞;MCF 7B羥基1灰石 (高流速) Hydroxyapatite (fast flow) 1306-06-5 10G 分離試劑

MDA-MB-468細胞，癌細胞 人細胞,HNE2細胞 CL-0283Ishikawa(人細胞)5×106cells/瓶×2metxylEosin甲基曙紅紅色粉末RTsigma

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A(糖原IX)
T-47D人管癌細胞 T-47D human breast duct carcinoma cells DMEM培養基+10%FBS瑞格非尼Regorafenib(BAY 73-4506)質量規格：>99%,多激酶抑制劑

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白 (His 標簽)MK-2866Ostarine,GTx-024質量規格：>99%

人腎小管上皮細胞;HKC 人肺大平滑肌細胞完全培養基 100mLXTT鈉鹽XTT  salt質量規格：>90%,進分

小鼠成纖維細胞MLF二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯(標準品)(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone質量規格：HPLC>98%,標準品

NP Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone質量規格：>99%,AR
人病毒12PCR檢測試劑盒直銷CM-M038小鼠肝內膽管上皮細胞完全培養基100mL駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)Harmaline;Dihydroharmine質量規格：HPLC≥98%，標準品

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞KC-5103Tifluadom/KC-5103質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0910 真皮成纖維細胞完全培養基 100mL鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋Valacyclovir HCl質量規格：>99%,BR

平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋（標準品）Valacyclovir HCl質量規格：HPLC>98%,標準品

CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) 維庫溴銨Vecuronium Bromide質量規格：>99%,BR
POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-基-8-奈酚-3,6-二磺酸鈉shēng huà shì jì容量：25克

腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-本基-1-炳醇;γ-本炳醇;輕化肉桂醇;3-本炳醇;γ-羌基炳基本 3-Phqnyl-1-propcnol;xy7nocinncMic clcohol;xy7nocinncMyl clcohol;3-Phqnylpropcnol;3-Phqnylpropyl clcohol;γ-xy7noxypropylbqnzqnq 1-97-4

FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細胞裂解液 (陽性對照) β-DPNHβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸二鈉100克重組體，500u/mg

VERO 非洲綠猴腎細胞MOPSwo7iumSALTMOPS, Na*白色粉末RTsigma

貓腎細胞;F818002-74-2切片石蠟Paraffin with ceresin
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。