PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：人類嗜淋巴細(xì)胞病毒1型PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2十二烷基本磺酸鈉-6，英文名或英文縮寫：wo7ium dodecylbenzenesulfonate，級別：FMP，規(guī)格：1克

RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-脫氧-D-葡萄糖-5-鱗醋酯內(nèi)鹽 ≥99.0% (TLC)(-20°C) (2,3-dixy7noxy-4-oxo-pqntoxy)phosphonic ccid 190079-18-6

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]紅色氧化;四氧化三;丹;紅丹;氧化 Lqcd(II,IV)oxidq;MiniuM 1314-41-6

AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) AEBSFAEBSF蛋白組學(xué)級50MG30827-99-7COLD

小腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6284-40-8葡MegluMine (AS)
RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酰輔酶A三鋰鹽Acetyl coenzyme A trilithium salt質(zhì)量規(guī)格：95%,美國進(jìn)口原裝

人胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL尿素酶,脲酶(巨豆)Urease質(zhì)量規(guī)格：>45 U/mg,進(jìn)分

HT1080細(xì)胞，人成纖維細(xì)胞 熱帶念珠菌 tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3蛋白酶VIIIProtease type VIII質(zhì)量規(guī)格：美國原裝進(jìn)口7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌

CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白曲安奈德Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曲安奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒1型PCR檢測試劑盒價格PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 草酸依地普侖/草酸艾司西酞普蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）Escitalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril質(zhì)量規(guī)格：>99.5%，EP6.2

BEL-7402細(xì)胞，細(xì)胞 人口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲（標(biāo)準(zhǔn)品）Racecadotril質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

C57BL/6小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin質(zhì)量規(guī)格：>1200u/mg,CP2005

CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼羅替尼Nilotinib質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)熒光素酶(細(xì)菌)，英文名或英文縮寫：Luciferase from Bacteria，級別：精制級，40u/mg，規(guī)格：5克

T/G細(xì)胞，人平滑肌細(xì)胞 KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞瘤株,LⅡ細(xì)胞 人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物HDF-f L三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑

NEC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2拂橡膠 III Fluoro gum III

Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級1000 UnitsCOLD

綿羊皮膚細(xì)胞;OAR-S1硅烷偶聯(lián)劑SILANE COUPLING AGENT
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。