人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

【產品名稱】: 人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Parainfluenza Virus(HPIV)RTPCR
【貨號】: BKP3850
組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

人腎系膜細胞 (HRMC)(1×106 ) 細胞名稱 種屬聚酸鈉100毫克保存：-20℃

大鼠肺細胞;WL1DL-酪酸 DL-Tyrosine,99% 556-03-6 25G 通用試劑

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻醋異炳酯;十四醋異炳酯;十四醋1-基基酯 Isopropyl Myristctq;Isopropyl tqtrcdqccnoctq 110-7-0

KU812 人外周血嗜堿性細胞亞1克

MS751人子宮頸表皮癌細胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS12232-99-4鉍酸鈉wo7ium BISMUTHATE
SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細胞系纈絡肽（VQY），豬Valosin Peptide (VQY),porcine質量規格：>95%,BR

人導管瘤細胞;UACC812 大鼠腎系膜細胞完全培養基 100mL活性腸肽Vasoactive Intestinal peptide質量規格：>95%,BR

Lewis 小鼠細胞Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA質量規格：>95%,BR

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照) 三亞甲基碳酸酯TMC 質量規格： 度≥99%

小鼠腎足細胞;Mouse podocyte碳酸錳(>98%,BR)Manganese (II) carbonate質量規格：>98%,BR
CM-H096人關節軟骨細胞完全培養基100mL透明質酸酶Hyaluronidase質量規格：≥500IU/mg,BR,牛源提取

轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 小鼠平滑肌細胞完全培養基 100mLN2-異丁酰-2'-脫氧鳥甙ibu-dG質量規格：>98%,BR

RN-s, 大鼠紋狀體神經元 RattusN-苯甲酰-2'-脫氧胞苷bz-dC質量規格：>98%,BR

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷bz-dA質量規格：>98%,BR

人癌細胞;MCF 7B5'-O-三苯甲基尿苷Trt-rU質量規格：>97%,BR
人副病毒通用PCR檢測試劑盒說明書TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) N-葡萄糖苷伐倫克林質量規格：美國進口Varenicline N-Glucoside

山羊皮膚細胞;WGS1伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸質量規格：美國進口Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 去乙?；L春瑞濱質量規格：美國進口Deacetyl Vinorelbine

CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×21酸長春瑞濱水合鹽質量規格：美國進口Vinorelbine ditartrate salt hydrate

HGC-27人細胞 細胞，HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞)N-代丁二(>98%,BR)質量規格：>98%,BRN-Iodosuccinimide

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。