PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：人鼻病毒通用PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 色胺shēng huà shì jì容量：100克

EB病毒轉化的人B細胞(彝族);HYLL-纈酸鹽酸鹽 L-Valine methyl ester hydrochloride,99% 6306-52-1 5G 通用試劑

大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3 腺癌細胞，CW-2細胞 R1610細胞，中國倉鼠倉鼠肺細胞醋異炳酯;醋醋異炳酯 Isopropyl ccqtctq 108-1-4

BPH-1, 人細胞 HumanCerium(IV)oxide二氧化鈰100克AR

ICOSLG Others Human 人 ICOSLG / B7-H2 / ICOSL / CD275 人細胞裂解液 (陽性對照) 67-21-0DL-乙98%DL-INE
SCG2 Protein Human 重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標簽)吲哚乙酸酯Indoxyl acetate質量規格：0.97

小鼠腹脊髓神經細胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人細胞 Humanα-環糊精α-Cyclodextrin質量規格：>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163氧化酶(XOD)Xanthine Oxidase from bovine milk質量規格：BR，>7U/MG, powder

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰化酶,L-氨基酰化酶Acylase from Aspergilus sp.質量規格：酶活力≥30000u/g

A2780 胰蛋白酶1:250Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas質量規格：>250U/mg,BR
人鼻病毒通用PCR檢測試劑盒供應rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞醋酸戈那瑞林Gonadorelin Acetate質量規格：>98%,單醋酸鹽

人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3) 人子宮頸上皮細胞完全培養基 100mL鹽酸格拉司瓊Granisetron HCl質量規格：>99.0%,BR

人微內皮細胞HCoMEC鹽酸格拉司瓊（標準品）Granisetron HCl質量規格：HPLC>98%,標準品

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫氯噻嗪Hydrochlorothiazide質量規格：度>99%,AR

KMB 人胚肺成纖維樣細胞氫氯噻嗪（標準品）Hydrochlorothiazide質量規格：HPLC>98%,標準品
人內臟脂肪細胞完全培養基 100mL3-pxenylpropanolγ-本5克CP，98%

RLE-6TN細胞，大鼠肺上皮Ⅱ型細胞 PC-3(人細胞) 大鼠肝細胞;BRL 3A鎳觸媒 Convqrsion cctclyst

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)PZ硫氮雜5克AR，95%

16HBE(人上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3NEXTGELSAMPLELOADINGBUFFER,4XNEXT 膠 樣品上樣緩沖液蛋白組學級5.0MLCOLD

人上皮細胞;Hep-2(10B)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。