PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：同牛病毒1型牛鼻病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

小鼠樹突狀細胞細胞;DCS鋁鉀1克

AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 2，4-二基-6-叔丁基本酚 2-(tqrt-Butyl)-4,6-dimqthylphqnol 1879-09-0

KM小鼠子瘤株;U27代本1公斤

IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄化鈉蔗糖瓊脂shēng huà shì jì容量：100毫升

CaEs-17, 人細胞株107-93-7;β-甲基酸;亞乙基乙酸;2-酸(反式);1-羧基;α-酸Crotoni acid;α-Crotoni acid;β-metxylacrylic acid;Solid crotoni acid;1-Carboxypropylene;α-Butenic acid
PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 酮麝香(標準品)Musk ketone質量規格：HPLC≥98%,標準品

NCI-H1650 人非小細胞細胞苯甲酰基十字孢堿(PKC-412)Midostaurin質量規格：≥96%,美國進口

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人細胞無水鄰菲啰啉；1,10-菲羅啉1,10 –Phenanthroline anhydrous質量規格：AR,>99%

THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)鄰菲啰啉一水；1,10-菲羅啉一水1,10-Phenanthroline hydrate質量規格：AR,>99%

人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk 人成纖維細胞完全培養基 100mL鄰菲啰啉鹽酸鹽一水；1,10-菲羅啉鹽酸鹽1,10-Phenanthroline  hydrochloride monohydrate質量規格：AR,>99%
同牛病毒1型牛鼻病毒PCR檢測試劑盒價格FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,5-二氯鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4,5-Dichlorophthalonitrile質量規格：>98.0%(GC)(N)

GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細胞4-十二烷氧基鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))4-Dodecyloxyphthalonitrile質量規格：>99.0%(GC)

CM-M022小鼠甲狀腺上皮細胞完全培養基100mL4-叔丁基杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[4]arene質量規格：>98.0%(HPLC)

LX-2, 人肝星形細胞株4-叔丁基杯[5]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[5]arene質量規格：>98.0%(HPLC)

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0906 人內臟脂肪細胞完全培養基 100mL杯[8]芳烴(>90.0%(HPLC))Calix[8]arene質量規格：>90.0%(HPLC)
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)Siliconedefoamer有機硅消泡劑5克AR，99%

BC-020(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠子細胞;U143-庚同;基丁基同;丁基基同;基正丁基同 3-Hqptcnonq;n-Butyl qthyl kqtonq;3-Oxohqptcnq 106-32-4

人臍動脈內皮細胞HUAECPyridaben2-叔丁基-5-(4-叔丁芐基硫)代-4-錄-3(二氫)噠嗪酮1公斤BR，98%

CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC / SCYA17 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 扶硼酸shēng huà shì jì容量：RT1克

非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7500-22-13-;-3-; 3-; 3-醛基3-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-3-aldehyde; Nicotinaldehyde; Nicotinicaldehyde; 3-Pyridylaldehyde; 3-Pyridinecarbaldeh;
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。