甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

【產品名稱】: 甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Influenza Virus ARTPCR
【貨號】: BKP3902
組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL纖粘連蛋白shēng huà shì jì容量：RT1克

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6

上皮細胞生長添加物EpiCGS維生素A棕櫚酸酯shēng huà shì jì容量：10克

Hs 578T細胞，人成纖維細胞 人原胚腎轉化細胞系,293 Ad5+細胞 胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)戊二酸5克

雪羊皮膚細胞;SSHS1(番紅O)
MuM-2B細胞，人眼脈絡色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

趨化因子3-O-甲基 4-羥基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol質量規格：美國進口

LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3質量規格：美國進口

小耳豬肺細胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4質量規格：美國進口

人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Sulfate質量規格：美國進口
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 細胞，P3X63Ag8.653細胞 RN-c細胞，大鼠皮層神經元細胞殺螟丹(標準品)Aramite質量規格：分析標準品,99%

人臍內皮細胞;HUV-EC殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution質量規格：100μg/ml,u=3%

LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照) Amberlite?IRA402 強堿型陰離子交換樹脂(氯型)Amberlite? IRA402質量規格：氯型

腦動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)Amberlite® XAD1180N質量規格：粒徑0.350 - 0.600 mm

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 嘧菌酯（標準品）Azoxystrobin質量規格：分析標準品
甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十七烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500毫克

兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)無水錄化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2

QG-56細胞，人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞完全培養基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用試劑

Saos-2(人細胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7shēng huà shì jì容量：RT5克

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。