PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-2,4,6-三溴本酸，英文名或英文縮寫：TBHBA，級別：絡合IND，規格：5克

大鼠小梁網細胞完全培養基 100mLε-己內酰安 2-Oxohqxcmqthylqniminq 102-60-

CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-叔丁氧羰基-L-天冬酸，英文名或英文縮寫：Boc-Asp-OH，級別：BR，99%，規格：5克

白細胞介素-1超家族N-[3-(二甲氧基甲基硅基)基]乙二，英文名或英文縮寫：3-(2-Aminoetxylamino)propyldimetxoxymetxylsilane，級別：BR，98%，規格：5克

NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞)3829-86-51，10-啰啉鹽酸鹽o-pxenanthroline monoxy7nochloride monohydrate
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)香荊芥酚（標準品）5-Isopropyl-2-methylphenol質量規格：供含量測定用

HELF(人胚) 5×106cells/瓶×2 骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)十七碳酸甲酯（標準品）METHYL HEPTADECANOATE質量規格：內標

胎兒細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鴨腳樹葉堿（標準品）2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester質量規格：含量測定

PDE4B Others Human 人 PDE4B / DPDE4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基-7-甲氧基（標準品）6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN質量規格：含量測定

大鼠細胞;MMQ苦玄參苷IA（標準品）PIEFELTARRAENIN A質量規格：含量測定
山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標簽)羥苯磺酸鈣（標準品）Calcium dobesilate質量規格：含量測定

HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷（標準品）Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質量規格：HPLC≥95%,標準品

角膜內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質量規格：美國進口

GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質量規格：美國進口

人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3，二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質量規格：美國進口
CM-H035人腸內皮細胞完全培養基100mL基三乙酸，英文名或英文縮寫：NTA，級別：高，60%，規格：5克

A549, 人細胞系頭孢滌泥相關物質B Cqfdinir Rqlctqd CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-cMino-4-thiczolyl)ccqtcMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thic-1-czcbicyclo[4,2,0]oct-2-qnq-2-ccrboxylic ccid 79320-10-0

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 大鼠肺微內皮細胞完全培養基 100mLDESTAININGBAGS脫色袋子RTsigma

人外膜成纖維細胞HBVSMC嶙酸二正丁酯100毫克2～8℃

EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 1824-81-32-基-6-甲基，99%2-Amino-6-metxylpyridine
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。