技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
肺大平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)聚乙二醇6000500克

Molt-4細胞，人T細胞(CD8+) 小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞,MPC-83細胞 人尿道上皮細胞cDNAHUC cDNA2,2-聯≥99% 2,2'-Dipyridyl 366-18-7

PA-1(人卵巢腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸胍1克

CRFK(貓腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]布氏肉湯25毫升

大鼠細胞;MMQ68399-77-93-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸 (MOPSO)MOPSO
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0922 人表皮角質形成細胞完全培養基 100mL特比萘芬-d7鹽酸鹽Terbinafine-d7 Hydrochloride質量規格：美國進口

小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1羥基特比萘芬Hydroxy Terbinafine質量規格：美國進口

C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細胞裂解液 (陽性對照) 羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS胸腺五肽Thymopentin質量規格：美國進口

SF767細胞，人細胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內皮細胞總RNAHAEC NA替米考星1酸鹽Tilmicosin phosphate salt質量規格：美國進口
麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照) N-亞硝基-N-甲基尿烷(>95.0%(GC))N-Methyl-N-nitrosourethane質量規格：>95.0%(GC)

人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,EMUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG質量規格：>98%,BR

NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 米諾地爾Minoxidil質量規格：>98%

CM-R030大鼠腸粘膜上皮細胞完全培養基100mL米諾地爾(標準品)Minoxidil質量規格：>98%,標準品

MCF-7 [MCF7], 人癌細胞系 牛胚氣管細胞,EB細胞 Hs 578T(人成纖維細胞)米諾地爾（硫酸鹽）敏樂啶Minoxidil Sulfate質量規格：>99.0%
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照) DHA脫氫醋酸10克BR

人口腔角質細胞裂解物HOKL鹽酸環胞苷 Ancitabine hydrochloride 10212-25-6 1G 通用試劑

IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照) 六拂鱗醋 Hqxcfluorophosphoric ccid;

BRL-3A 大鼠正常肝細胞dTTP(2'-DEOXYTHYMIDINE-5'-TRIPHOSPHATE)TRIwo7iumSALTDIHYDRATE dTTP, Na3, 2H2O超級白色干燥結晶粉末FROZENsigma

CL-0118HT-29(人細胞)5×106cells/瓶×299-76-3尼泊金metxylparaben