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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    分枝桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):BKP4038
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-11-12
    • 更新日期: 2025-11-12
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號(hào) BKP4038
    用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號(hào)
    是否進(jìn)口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

    實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

    產(chǎn)品名稱

    英文名稱

    貨號(hào)

    分枝桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

    Mycobacterium spp.PCR

    BKP4038

    PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
    10×PCR buffer                   
    5 μl     dNTP mix
    2mM             
    4 μl     
    引物110pM                 
    2 μl     
    引物210pM                 
    2 μl     Taq
    2U/μl               
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl  
    1 μl     
    ddH2O 50 μl  
    PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2
    :調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
    3
    :伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
    4
    PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

    反應(yīng)五要素:
    參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
    引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
    引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
    引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
    引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
    引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
    引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
    引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
    EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)L(+)-2--5-脲戊酸,英文名或英文縮寫(xiě):L-Citrulline,級(jí)別:BR99%,規(guī)格:25

    HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)1,2-二基本;鄰二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3

    HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞桑色速;摩林;;2,3,4,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3

    SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 媒染藍(lán)B,英文名或英文縮寫(xiě):Acid alizarin blue B,級(jí)別:ACS級(jí),規(guī)格:1

    人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B1114-34-7D-來(lái)蘇糖D-LYXOSE
    DYRK3 Others Human
    DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:

    tTA基因修飾的小鼠(B);F9-CAG-tTA-4D6交叉縫式碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)

    COLO 205細(xì)胞,細(xì)胞 正常人肝細(xì)胞,L-02細(xì)胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞)5×106cells/瓶×2復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)(允許溫度上限:620)Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C)質(zhì)量規(guī)格:

    APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)

    CLEC4M Others Human CD299 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 復(fù)壁碳納米管 小于10nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格:>95%(TPO Method)
    分枝桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:BR

    JeKo-1 人套細(xì)胞瘤細(xì)胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    22RV1人細(xì)胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質(zhì)量規(guī)格:0.99

    其他細(xì)胞因子2-脫氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    小鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 HumanD-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galactose質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
    大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene

    QG-56細(xì)胞,肺扁平上皮癌細(xì)胞 人口腔上皮癌長(zhǎng)春新堿耐藥株,KB/V細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone

    小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene

    IFNGR1 Others Human IFN-gamma R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-](>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]

    人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione

    特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1. 特異性:分枝桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%
     2.   
    重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
    3.   
    靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   
    實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
    5.   
    優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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