技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：通用PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
EL4 小鼠瘤細胞5-溴-4錄-3-吲哚N-乙酰-β-D-基半乳糖苷100克RT

IFNL1 Others Human 人 IL-29 / Ierleukin-29 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氮鳥嘌呤(-20℃) 8-cZcGUcNINq 134-28-7

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉細菌學級5 KGRT

ATP1B1 Others Human 人 ATP1B1 人細胞裂解液 (陽性對照) 二水鉍酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium bismuthate，級別：BR，99%，規格：1克

CM-M092小鼠關節軟骨細胞完全培養基100mL，4-丁2-Butyne-1,4-diol
IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) 特利加壓素Terlipressin Acetate質量規格：>98%,BR

CM-R122大鼠視網膜神經節細胞完全培養基100mL甲砜霉素Thiamphenicol質量規格：>98%,BP

KYSE30細胞，人食管鱗癌 人膠質母細胞瘤細胞,A172細胞 山羊皮膚細胞;WGS1甲砜霉素（標準品）Thiamphenicol質量規格：HPLC>98%,標準品

CCRF-CEM(人急性細胞) 5×106cells/瓶×2胸腺五肽Thymopentin Acetate質量規格：>98%

PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸噻加賓 Tiagabine HCl質量規格：≥99.0%,BR
通用PCR檢測試劑盒價格CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Boc-L-丙氨酸 N-丁二酯Boc-Ala-OSu質量規格：BR

小鼠單核巨噬細胞細胞;RAW 264.7 [RAW264.7BOC-D-丙氨酸Boc-D-Ala-OH質量規格：>98.5%,BR

CHO/dhFr-細胞，中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細胞 人細胞,HuH-7細胞 CL-0144LoVo(人細胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-天冬氨酸Boc-Asp-OH質量規格：>98.5%,BR

中國倉鼠肺細胞;V79BOC-L-谷氨酸Boc-L-Glutamic acid質量規格：>98.5%,BR

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-亮氨酸Boc-Leu-OH質量規格：>98.5%,BR
人上皮細胞HPEpiC,CRYSTALLINE(環已亞胺)超級白色至淡黃白色粉末COLD不sigma

IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) 葉綠素AB混合物 Chlorophyll 1406-65-1 5G 通用試劑

牦牛皮膚細胞;BMU-S1冷結樹酯 GqLLcN GUM 71010-2-1

大鼠癌細胞;MADB106 胃腺癌細胞，AGS細胞 SDBMSC細胞，SD大鼠骨髓間充質干細胞NADPDIwo7iumSALTTRIHYDRATE氧化型輔酶Ⅱ 二鈉試劑級米白色粉末FROZENsigma

U266B1 [U266], 人細胞 Human(價酰按)