PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

FLT1 Others Human 人 FLT1 / VEGFR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-奈酚100毫克

CCD-18Co 正常人組織細胞沉香油醇 Linalool,97% 78-70-6 25ML 通用試劑

CL-0062CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2乳糖 Lcctosq stcndcrd 10039-6-6

NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系微量可調移液器P2.51克

EB病毒轉化的人B細胞(傣族);KM9405 人大隱平滑肌細胞完全培養基 100mL7440-5-3PalladiuM
HEL(人紅白細胞細胞) 5×106cells/瓶×2炔雌醇17-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 17-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

hMSC-UC-c 從臍帶基質提取的的人類間質干細胞(hMSC-UC) 500,000cells 大鼠小膠質細胞RM炔雌醇3-醋酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Acetate質量規格：美國進口

小鼠骨髓細胞;FDC-P1β-雌二醇 3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽β-Estradiol 3-(β-D-glucuronide)  salt質量規格：美國進口

MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / MER 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基炔雌醇2-Hydroxy Ethynyl Estradiol質量規格：美國進口

MDA-MB-415 人腺癌細胞4-羥基炔雌醇4-Hydroxy Ethynyl Estradiol質量規格：美國進口
曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢測試劑盒說明書大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1亥茅酚苷（標準品）Sec-O-Glucosylhamaudol質量規格：HPLC≥97%，標準品

RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-谷氨酸D-Glutamic acid質量規格：0.98

平滑肌細胞培養基SMCMTLCK(進分)Nα-Tosyl-L-lysine chloromethyl ketone HCl質量規格：進分,sigma T7254

AMBP Others Human 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘氨酰-L-酪氨酸；甘洛二肽Glycyl-L-tyrosine質量規格：>98%,BR,水合物

人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701]D-亮氨酸D-Leucine質量規格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B 小鼠L6565克隆細胞系，L6565細胞 RTG細胞，鮭魚胚胎細胞西立伐他汀內酯質量規格：美國進口Cerivastatin Lactone

人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2去甲基西立伐他汀鈉鹽質量規格：美國進口Desmethyl Cerivastatin,  Salt

PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照) 羥基西立伐他汀鈉鹽質量規格：美國進口Hydroxy Cerivastatin  Salt

視網膜muller細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)去甲基羥基西立伐他汀鈉鹽質量規格：美國進口Desmethyl Hydroxy Cerivastatin  Salt

CD96 Others Human 人 CD96 人細胞裂解液 (陽性對照) 氨芬酸鈉(標準品)質量規格：含量測定Amfenac
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。