PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：絲狀支原體絲狀亞種型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

孔雀綠1酸鹽檢測試劑盒MGmP固紅GG鹽shēng huà shì jì容量：1克

PDCD1 Others Rat 大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2’,3’,4’-三氧基本同 2,3,4-Trixy7noxybqnzophqnonq 1143-7-

人紅系細胞;TF-1十八醇shēng huà shì jì容量：1克

雜交瘤(B類);C3110D2B2 細胞，DU145細胞 H4-ⅡE細胞，大鼠細胞48孔細胞培養板1毫克 保存：-20℃

WM451, 人色素瘤細胞 Human9006-59-1卵蛋白片ALBUMIN, HORSE
CM-H027人成纖維細胞完全培養基100mL左旋氨氯地平/苯磺酸左旋氨氯地平(S)-Amlodipine質量規格：>97%

SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株左旋氨氯地平/苯磺酸左旋氨氯地平（標準品）(S)-Amlodipine質量規格：含量測定

人細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 大鼠肺平滑肌細胞完全培養基 100mL曲尼司特Tranilast質量規格：>98.0%

子宮內膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)曲尼司特(標準品)Tranilast質量規格：≥98%,標準品

CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢羥氨芐 （標準品）CEFADROXIL質量規格：HPLC含量測定用
絲狀支原體絲狀亞種型PCR檢測試劑盒直銷3T6-Swiss albino細胞，胚胎成纖維細胞 人細胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞 CM-M040小鼠肝竇內皮細胞完全培養基100mL丁胺卡那霉素無水Amikacin質量規格：效價：>900 u/mg

正常大鼠腎細胞;NRK氨茶堿(>98%,BR)Aminophyllin hydrate質量規格：>98%,BR

CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸鉍銨Ammonium bismuth , hydrate質量規格：BR

人脈絡叢成纖維細胞cDNAHCPF cDNA溴化銨(>99%,BR)Ammonium bromide質量規格：>99%,BR

KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 人細胞裂解液 (陽性對照) 化銨(>99%,BR)Ammonium iodide質量規格：>99%,BR
EFNA4 Protein Human 重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)D-pxenylglycineetxylesteroHCl(R)-α-基乙酯氫錄化物5克BR，98%

U251(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6燦爛皇 BRILLIcNT YqLLOW 3021-11-4

人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL3,3',5,5'-四甲基聯... 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (≥99%,... 54827-17-7 100MG 染色劑

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Decyltrimetxylammoniumbromide(1-癸基)基溴化5克超，99%

小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1L-LysineHCl 100g/250g/Sigma25g 國產
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。