技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：滑液支原體PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NHEM.f-c 正常人表皮素細胞(NHEM)少年者 500,000cells 視網膜muller細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)metxyllinolenate順-9，12，15-十八碳三1酸500克AR，45%

膠原I-3D凝膠試劑盒C3DGKβ- β-Alanine,99% 107-95-9 500G 通用試劑

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙環務烷六拂鱗醋鐵 FqRROCqNIUM HqXcFLUOROPHOSPHcTq 11077-4-0

人視網膜微內皮細胞完全培養基 100mL頭孢菌素Ⅳ，英文名或英文縮寫：Cephalexin monohydrate，級別：BR，500u/mg，規格：1毫克

FAT細胞，大鼠細胞 SHZ-88(大鼠癌細胞) 大額牛肺細胞;BFR-L17758-97-6酸　Lead chromate
CL-0149MCF-7(人癌細胞)5×106cells/瓶×2蔗糖1酸化酶Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides質量規格：BC Grade

NIH/3T3細胞，鼠成纖維細胞系 人Butts瘤細胞系,CA46細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1磺胺二甲嘧啶鈉(>99%,BP)Sulfamethazine  salt質量規格：>99%,BP

Anglne(人細胞) 5×106cells/瓶×2磺溴酞鈉(>98%,BR)Sulfobromophthalein di salt hydrate質量規格：>98%,BR

CXCL12 Others Human 人 CXCL12 / SDF1b 人細胞裂解液 (陽性對照) Sulfo-MBSSulfo-MBS質量規格：BR

豬腎傳代細胞;IBRS-2四庚基溴化銨(>98%,BC)Tetraheptylammonium bromide質量規格：>98%,BC
滑液支原體PCR檢測試劑盒說明書CM-H021人平滑肌細胞完全培養基100mL氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)Dimethyl Sulfoxide-D6質量規格：D,99.8%+TMS 0.03%

Lncap細胞，細胞 膀胱變移細胞癌細胞,T-24細胞 人胚腎細胞;293 Cells, low passage氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)Dimethyl Sulfoxide-D6質量規格：D,99.9%

615小鼠株;Ca763氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規格：D,99.8%+TMS 0.03%

TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規格：D,99.9%

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN氘代DMSO-D6(10 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規格：D,99.8%+TMS 0.03%
人癌細胞;MDA-MB-453牛白蛋白，英文名或英文縮寫：BSA，級別：精制級，350-600u/mg，芬末，規格：25克

NCI-H661細胞，大細胞細胞 人細胞,HONE1細胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×23,4-三拂本硼醋 3,4,5-Trifluorophqnylboronic ccid 143418-49-9

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1SSCBUFFER,20X,WITH1%SARCOSYL SSC,含 1% 十二烷基肌酸鈉超級透明無色液體RTsigma

PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 激動素，英文名或英文縮寫：6-KT，級別：USP級，95%，規格：1克

膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)21645-51-2氫氧化鋁AluMiniuM xy7noxide;Hydrated aluMina;AluMinuM trihydrate